紫外可见吸光光度法及分子荧光分析法.pptVIP

紫外可见吸光光度法及分子荧光分析法;化学分析：常量组分(1%), Er : 0.1%～0.2% 依据化学反应, 使用玻璃仪器 ;仪器分析方法分类;分子光谱学 ;光声光谱法 (PAS) Photo Acoustic Spectroscopy 拉曼光谱法 (RS) Raman Spectroscopy *核磁共振波谱法(NMR) Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy *质谱法 (MS) Mass Spectroscopy 发展联用技术是趋势!;8.1 吸光光度法的基本原理;I0;8.1.1 光的基本性质 (电磁波的波粒二象性) ;X; h－普朗克(Planck)常数 6.626×10-34J·s ?－频率 E－光量子具有的能量 单位：J(焦耳)，eV(电子伏特) 1eV=1.602×10－19 J;结论:一定波长的光具有一定的能量，波长越 长(频率越低)，光量子的能量越低. 单色光：具有相同能量(相同波长)的光. 混合光：具有不同能量(不同波长)的光复合在 一起. 例如白光.; 电磁波谱及分析方法;光学光谱区;8.1.2 物质对光的吸收与发射;S2;光谱种类;?/nm;熔融石英;Cr2O72-、MnO4-的吸收光谱;苯和甲苯在环己烷中的吸收光谱;不同物质吸收光谱的形状以及?max 不同 ——定性分析的基础 同一物质，浓度不同时，吸收光谱的形状相同，Amax 不同 ——定量分析的基础;8.1.3 光吸收基本定律:朗伯-比尔定律;朗伯-比尔定律;透光率(透射比）T（Transmittance）;吸光度A、透射比T与浓度c 的关系;K 吸光系数 Absorptivity ;吸光度与光程的关系 A = abc ;吸光度与浓度的关系 A = abc;吸光度与波长的关系 A = abc;朗伯-比尔定律的适用条件;溶液浓度的测定;8.1.4 吸光度的加和性与吸光度的测量;8.2 光度分析的方法和仪器;2. 光电比色法; 滤光片;3. 吸光光度法和分光光度计;分光光度计的主要部件;氙灯;单色器：将光源发出的连续光谱分解为单色光的 装置。 ;光栅：在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽度等间距条痕(600、1200、2400条/mm )。 利用光通过光栅时发生衍射和干涉现象而分光。;吸收池(比色皿)：用于盛待测及参比溶液。 可见光区：光学玻璃池 紫外区：石英池;硒光电池（Barrier-layer photocell）;光电管(Phototube);光电倍增管(Photomultiplier Tube, PMT);722型分光光度计;吸光光度法仪器主要差异比较;1. 单光束分光光度计;2. 双光束分光光度计;多通道仪器（Multichannel Instruments） 光电二极管阵列(通常具有316个硅二极管) photodiode arrays (PDAs) 同时测量200～820nm范围内的整个光谱, 比单个检测器快316倍,信噪比增加3161/2 倍. ;HP 8452A多通道二极管阵列分光光度计;镀铝反射镜;纤维光度计;习 题