中华鳖嗜水气单胞菌微球缓释疫苗的研制及免疫效果_刘亚东中华鳖嗜水气单胞菌微球缓释疫苗的研制及免疫效果_刘亚东.pdfVIP

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2017-04-25 发布于贵州
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中华鳖嗜水气单胞菌微球缓释疫苗的研制及免疫效果_刘亚东中华鳖嗜水气单胞菌微球缓释疫苗的研制及免疫效果_刘亚东

２０１４年第３４卷　第２期河北大学学报（自然科学版）Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｅｂｅｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｅｄｉｔｉｏｎ）２０１４Ｖｏｌ．３４Ｎｏ．２ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－１５６５．２０１４．０２．０１４中华鳖嗜水气单胞菌微球缓释疫苗的研制及免疫效果刘亚东，李彬，高利伟，管越强（河北大学生命科学学院，河北保定０７１００２）　　摘　要：为通过免疫防治途径控制嗜水气单胞菌引起的多种中华鳖疾病，采用复乳化－溶剂挥发法制备缓释微球疫苗，通过灌胃方式免疫中华鳖（体质量１５０～２００ｇ），每只灌胃０．０５ｇ或０．１ｇ，微球含灭活菌约为６．７５×１０１０／ｇ．免疫应答反应结果显示，缓释微球疫苗体外释放可持续近４０ｄ，血清抗体效价、白细胞吞噬率、白细胞吞噬指数及淋巴细胞转化率最高分别可达５１２，７１．２５％，１．５１和７７．２５％．结果表明：中华鳖嗜水气单胞菌微球缓释疫苗可以达到注射灭活菌液疫苗的水平，且持续性略优于注射免疫．通过灌胃方式（０．１ｇ／只）、注射方式分别对中华鳖进行免疫，研究攻毒后的免疫保护率，结果显示注射免疫组和微球疫苗免疫组的免疫保护率均为８５％．免疫应答实验和攻毒实验结果分别证明了中华鳖口服缓释微球疫苗免疫的持续性和有效性．关键词：中华鳖；缓释微球疫苗；嗜水气单胞菌；免疫反应中图分类号：Ｓ９４７．１　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１０００－１５６５（２０１４）０２－０１９３－０８　收稿日期：２０１３－０６－２８　基金项目：河北省自然科学基金资助项目（２０１００００２５３）；保定市科技攻关计划项目（０９ＺＦ００３）；河北省现代农业产业技术体系淡水养殖创新团队项目　第一作者：刘亚东（１９８６－），男，河北唐海人，河北大学在读硕士研究生．　通信作者：管越强（１９７３－），男，河北深泽人，河北大学教授，博士，主要从事水生动物免疫与病害研究．Ｅ－ｍａｉｌ：ｇｕａｎｙｕｅｑｉａｎｇ＠ｈｂｕ．ｅｄｕ．ｃｎＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ａｅｒｏｍｏｎａｓ　ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ　ｓｕｓｔａｉｎｅｄｒｅｌｅａｓｅ　ｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅｓ　ｖａｃｃｉｎｅ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｉｍｍｕｎｅ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓＬＩＵ　Ｙａｄｏｎｇ，ＬＩ　Ｂｉｎ，ＧＡＯ　Ｌｉｗｅｉ，ＧＵＡＮ　Ｙｕｅｑｉａｎｇ（Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｈｅｂｅｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂａｏｄｉｎｇ　０７１００２，Ｃｈｉｎａ）　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｔｈｅ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｏｆ　Ｐｅｌｏｄｉｓｃｕｓ　ｓｉｎｅｎｓｉｓ　ｃａｕｓｅｄ　ｂｙ　Ａｅｒｏｍｏｎａｓ　ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａｔｈｒｏｕｇｈ　ｔｈｅ　ｗａｙ　ｏｆ　ｉｍｍｕｎｅ　ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，ｓｕｓｔａｉｎｅｄ－ｒｅｌｅａｓｅ　ｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅｓ　ｖａｃｃｉｎｅ　ｗａｓ　ｐｒｅｐａｒｅｄ　ｂｙ　ｅｍｕｌｓｉｏｎ－ｓｏｌｖｅｎｔ　ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ　ｉｍｍｕｎｅ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ａｆｔｅｒ　ｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ．Ｔｈｅｒａｎｇｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｕｒｔｌｅｓ　ｂｏｄｙ　ｗｅｉｇｈｔ　ｗａｓ　１５０－２００ｇ，ｔｈｅ　ｄｏｓｅ　ｗａｓ　０．１ｇ／ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ，ａｎｄ　６．７５×１０１０／ｇ　ｉｎａｃｔｉ－ｖａｔｅｄ　ｂａｃｔｅｒｉａ　ｗａｓ　ｃｏａｔｅｄ　ｉｎ　１ｇ　ｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔ　ｏｆ　ｉｍｍｕｎｅ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｄｕｒａｔｉｏｎ　ｏｆｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅｓ　ｒｅｌｅａｓｅ　ｗａｓ　４