选修三 现代生物技术 详尽复习幻灯片1.ppt

生物选修三复习;先问问自己，这些都掌握了没有？;11、限制性核酸内切酶的来源？ 12、限制性核酸内切酶的功能是什么？ 13、限制性核酸内切酶切割产生的DNA片断末端有哪两种形式？ 14、DNA连接酶的作用是什么？ 15、E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶的功能有什么不同？ 16、DNA连接酶和DNA聚合酶有什么区别？ 17、具备什么条件才能充当“分子运输车”？ 18、基因工程中使用的载体有哪几种？ 19、获取目的基因有哪几种方法？ 20、PCR技术的原理是什么？;21、PCR技术中基因增加的方式是什么？ 22、PCR技术的步骤包括哪几步？ 23、基因表达载体包括哪些必需部分？ 24、启动子的作用是什么？通常启动子来自哪里？ 25、终止子的作用是什么？ 26、将目的基因导入植物细胞有哪几种方法？ 27、将目的基因导入动物细胞的常用方法是？ 28、动物基因工程的受体细胞通常是？ 29、原核生物具有什么特点？ 30、大肠杆菌最常用的转化方法是什么？;概念：;基因工程概念;1、基因工程又叫做____ ___或__________ 。;基因工程的别名;;来源：原核生物 作用特点：特异性，即识别特定核苷酸序列（反向对称重复排列），切割特定切点（磷酸二酯键）。 结果：产生黏性未端（EcoRI）（碱基互补配对）或平末端（SmaI）。 ;;①具有1至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入 ②在受体细胞中能复制并稳定保存 ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择 ;小结;;（一）目的基因的提取;聚合酶链式反应（PCR）;利用PCR技术扩增目的基因;模板 原料 引物 　酶 控制温度;用化学方法直接人工合成;文库类型;（二）基因表达载体构建;（1）用一定的_________切割质粒，使其出现一个切口，露出____________。 （2）用_______________切断目的基因，使其产生 ____________。;转化:目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。;将目的基因导入微生物细胞;⑴分子水平检测： ①检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因： 方法——DNA分子杂交(探针与基因组DNA) ②检测目的基因是否转录出了mRNA： 方法——分子杂交（探针与生物体mRNA） ③检测目的基因是否翻译成蛋白质： 方法——抗原—抗体杂交(生物中蛋白质与抗体) ; 转基因生物 ;四、 基因工程的应用;3、基因诊断:用放射性同位素(如32P)、荧光分子等标记的DNA分子做探针，利用DNA分子杂交原理，鉴定被检测标本上的遗传信息，达到检测疾病的目的。;蛋白质工程;比较：基因工程和蛋白质工程;基因工程步骤;(2009福建卷) 转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答： ;（10福建卷）32．[生物—现代生物科技专题](10分)红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病由于天然EP0来源极为有限，目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO）期间要生产流程如右图;（1）图中①所指的是 技术。 （2）图中②所指的物质是 ，③所指的物质是 。 （3）培养重组CHO 细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞严物积累对细胞自身造成危害，应定期更换 。 （4）检测 rhEPO外活性需用抗rhEPO单克隆抗体。分泌单克隆抗体的 细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成;（10天津卷）Ⅰ.（14分）下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性金银，BamHI、HindIII、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点。 据图回答： （1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用 限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 的培养基上进行。;（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是 （填字母代号）。 A.启动子 B. tetR C.复制原点 D. ampR （3）过程①可采用的操作方法是 （填字母代号）。 A.农杆菌转化 B. 大肠杆菌转化 C.显微注射 D. 细胞融合 （4）过程②可采用的生物技术是 。;（5）对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利