紫外-可见分光光度法教学课件.pptVIP

第十章 紫外—可见分光光度法 ;§11.1 概述;单色光：只具有一种波长的光。 混合光：由两种以上波长组成的光，如白光。;;?/nm;2、吸收光谱或吸收曲线;300;§11.2 光的吸收定律—朗伯－比尔定律; κ与入射光波长、溶液的性质及温度有关。当这些条件一定时，κ代表单位浓度的有色溶液放在单位宽度的比色皿中的吸光度。;摩尔吸光系数ε的讨论;例1 浓度为25.0μg/50mL的Cu2+溶液，用双环已酮草酰二腙分光光度法测定，于波长600nm处，用2.0cm比色皿测得T=50.1%，求吸光系数a和摩尔吸光系数ε。已知M(Cu)=64.0。;; 定量分析时，通常液层厚度是相同的，按照比尔定律，浓度与吸光度之间的关系应该是一条通过直角坐标原点的直线。但在实际工作中，往往会偏离线性而发生弯曲。;一、物理因素;二、化学因素;§11. 4 紫外—可见分光光度计;作用：提供能量，激发被测物质分子，使之产生电子谱带 要求 ：发射足够强的连续光谱，有良好的稳定性及足够的适用寿命 类型：可见与近红外区：钨灯 400~1100nm 紫外区：氢灯或氘灯180~400nm;作用：从连续光源中分离出所需要的足够窄波段的光束 常用的元件：棱镜、光栅;功能：用于盛放试样，完成样品中待测试样对光的吸收 常用的吸收池：石英（紫外区） 玻璃（可见区） 吸收池光程：1cm 、2cm、3cm等 注意：为减少光的损失，吸收池的光学面必须完全垂直于光束方向。吸收池要挑选配对，因为吸收池材料的本身吸光特征以及吸收池的光程长度的精度等对分析结果都有影响。;作用：接受、记录信号 组成：检测器、放大器和读数和记录系统 常用检测器：光电管和光电倍增管 蓝敏（锑铯）光电管 210~625nm 红敏（氧化铯）光电管 625~1000nm ;单光束分光光度计 双光束分光光度计 双波长分光光度计（相互重叠多组分分析）;单光束分光光度计; 显色剂;;;;pH 与吸光度的关系曲线;;;;不同透光率时测定浓度的相对误差ΔcB/cB(ΔT=0.01) ;3、参比溶液的选择;（1）如果仅待测物与显色剂的反应产物有吸收，可用纯溶剂（或蒸馏水）作参比溶液 ??2）如果显色剂或其他试剂略有吸收，应用空白溶液（包括显色剂或其它试剂不加待测试样溶液）作为参比溶液。 （3）如试样中其它组分有吸收，但不与显色剂反应，则当显色剂无吸收时，可用试样溶液作为参比溶液；当显色剂略有吸收时，可在试液中加入适当掩蔽剂将待测组分掩蔽后再加显色剂，以此溶液作参比溶液。;§11. 7 分光光度测定的方法;二、多组分的测定; 例：用光程为1cm的吸收池，在两个测定波长处测定含有K2Cr2O7和KMnO4两种物质溶液的吸光度。混合物在450nm处的吸光度为0.38，在530nm处的吸光度为0.71，求混合物的组成。已知1.0?10-3 mol/L的K2Cr2O7 在450nm处吸光度为0.20，而在530nm处为0.05； 1.0 ? 10-4mol/L的KMnO4在450nm处无吸收，在530nm处吸光度为0.42。;KMnO4