4.1植物的组织培养 课件（北师大选修1）.pptVIP

第四章 现代生物技术;第1节　植物的组织培养;学习导航 1.学会尝试植物的组织培养。 2．说明植物组织培养的基本原理。;;2．方法步骤 (1)制备培养基：以___________为基本培养基，设计植物组织培养的几种培养基：诱导培养基、继代培养基、分化培养基、生根培养基 ↓ (2)灭菌：对上面的各培养基贴好标签并进行_________;(3)组织培养 ①胡萝卜洗净、切段：打开超净工作台，手 用70%酒精_______ ?↓ ②胡萝卜切段消毒：____________消毒30 s→ __________清洗2～3次→20%的___________溶液浸泡30 min→无菌水清洗2～3次 ↓;③切块：用____________吸去表面水分，在消毒瓷砖上，用无菌的解剖刀将胡萝卜段切成2 mm厚的横切片。选取有__________的部位切取2 mm×2 mm×2 mm左右的小块 ↓ ④接种：将组织块接种到无菌的_______培养基上，封盖瓶口 ↓ ;⑤培养：23～26 ℃恒温避光培养，统计并计算不同诱导培养基上培养材料的__________。培养30天左右，将愈伤组织转接到________培养基上继续避光培养 ?↓ ⑥转接、分化培养：将愈伤组织转接到______ 培养基上，23～26 ℃恒温光照培养，统计并计算分化率。将分化出的幼苗转接到生根培养基 上，培养14 d后，统计并计算___________。然后将试管苗移栽到大田栽培;(1)上述组织培养过程要经过一系列的消毒和灭菌() (2)只有切取形成层的部分才能形成植株(×) (3)培养基的不同类型主要取决于营养成分的不同(×);二、相关基础知识 1．植物组织培养的概念 在无菌和人工控制条件下，将_______的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，最终诱导产生 ___________、丛芽或完整植株的技术。 2．常用培养基：_______培养基、______培养基、N6培养基等。;脱毒苗;(2)工业上：进行一些细胞产物的工厂化生产，这些细胞产物包括蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等。;进行细胞产物的工厂化生产应将离体的植物体经组织培养至哪一阶段？ 【提示】　培养到愈伤组织阶段。;;2.生长素和细胞分裂素在脱分化和再分化过程中的作用 由愈伤组织进行再分化时，要先诱导其生芽，然后生根，可通过控制培养基中生长素和细胞分裂素的比值来???现。生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，其作用及特点为： (1)在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。 (2)使用顺序不同，结果不同;使用顺序;(3)用量比例不同，结果也不同 设：生长素/细胞分裂素＝x，则： ①若x高时，利于根的分化，抑制芽的形成； ②若x低时，利于芽的分化，抑制根的形成； ③若x适中，促进愈伤组织的形成。;特别提醒　在进行组织培养时，需配制四种培养基，期间进行三次转接，四种培养基的类型及顺序分别是诱导培养基、继代培养基、分化培养基、生根培养基。; 草莓生产上传统的繁殖方式易将所感染的病毒传播给后代，导致产量降低、品质变差。运用微型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本过程如下： 请回答： (1)微型繁殖培育无病毒草莓时，一般选取__________________________________________;作为外植体，其依据是__________________。 (2)在过程①中，常用的MS培养基主要成分包括大量元素、微量元素和____________，在配制好的培养基中，常常需要添加____________，有利于外植体启动细胞分裂形成愈伤组织。接种后2～5 d，若发现外植体边缘局部污染，原因可能是____________。 (3)在过程②中，愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是______________________________。;【解析】　(1)植物组织培养时常采用根尖或茎尖部位，原因是该部分含病毒极少，甚至无病毒。 (2)MS培养基的成分包括大量元素、微量元素和有机成分，在配制好的培养基中，常需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素。植物组织培养也应注意无菌操作。 (3)生长素用量比细胞分裂素用量的比值低时，有利于芽的分化，比值高时，有利于根的分化。;【答案】　(1)茎尖(或根尖)　茎尖(或根尖)病毒极少，甚至无病毒　(2)有机成分　植物激素　外植体消毒不彻底 (3)培养基中生长素类物质用量与细胞分裂素类物质用量的比值偏低;(1)过程①的全能性大小和分化程度发生怎样的变 化？ (2)若制备人工种子应培养至哪一阶段？ 【提示】　(1)全能性增大，细胞分化程度变小。 (2)经②过程形成芽、根的胚状体阶段