生化大实验论文.pdf

分类号: Q78 编号: 生物化学大实验实验论文 指导教师： 张彦桃 学 生： 孙雨傲 专 业 ： 生 物 工 程 年 级 ： 2 0 1 2 级 2015 年 8 月 24 日 内蒙古大学生命科学学院生物系本科生生化大实验实验论文 目录 生化大实验实验论文 3 摘要 3 背景 4 材料与方法过程 4 结果与分析 12 致谢 15 感想 16 参考文献 16 2 内蒙古大学生命科学学院生物系本科生生化大实验实验论文 生化大实验实验论文 摘要 碱性磷酸酶是一种磷酸单酯酶，广泛存在于人体组织和体液中。这种酶能 催化核酸分子脱掉 5’磷酸基团，从而使 DNA 或 RNA 片段的 5’-P 末端转换成 5’-OH 末端。但它不是单一的酶，而是一组同功酶。已发现有 AKP1、AKP2、 AKP3、AKP4、AKP5 与 AKP6 六种同功酶。其中第 1、2、6 种均来自肝脏，第 3 种来自骨细胞，第 4 种产生于胎盘及癌细胞，而第 5 种则来自小肠绒毛上皮与 成纤维细胞。本实验中使用我们在应用基础研究中建立的表达重组 His-BAP 的 大肠杆菌 BL21(DE3)工程菌株，在 IPTG 的诱导下表达有活性的重组 His-BAP 并 通过 SDS和 Western-blotting 进行鉴定目的基因在菌体内的正常表达， 从而学习在生物工程上游阶段完成后通过生化手段对所获取产物进行分离鉴定 的方法。 关键词：碱性磷酸酶 酶活力 层析 The report of Biochemical experiment ABSTRACT Bacterial alkaline phosphatase (BAP) is a phosphomonoesterase, which is widely distributed in human tissue and body fluids. This enzyme is demonstrated to catalyze the breakage of the 5’ phosphate group so as to transform 5’ end of DNA strand into 5’-OH. Also, previous study has already illustrated that BAP is not a single enzyme, on the contrary, it is a series of isoenzyme, namely AKP AKP2 AKP3 AKP4 AKP5 AKP6, among which AKP1 AKP2 AKP6 are from liver. AKP3 is from osteocyte. AKP4 arise f