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河北省唐山市开滦第二中学高中生物 2.1 微生物的实验室培养导学案 新人教版选修1
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河北省唐山市开滦第二中学高中生物 2.1 微生物的实验室培养导学案 新人教版选修1
班级: 姓名: 小组:
【学习目标】
了解培养基的基础知识,进行微生物培养和无菌技术的操作。
【重点难点】
重点:无菌技术的操作
难点:无菌技术的操作
【自主学习】
一、培养基
1.概念:人们按照微生物对 的不同需求,配制出供其 的营养基质叫培养基。可分为 培养基和 培养基。
2.营养构成:各种培养基一般都含有 、 、 和 ,此外还要满足微生物生长对 、 以及 的要求。
3.培养乳酸杆菌时需在培养基中添加 、培养霉菌时需将培养基PH调至 、培养细菌时需将PH调至 、培养厌氧微生物则需提供 条件。
【补充1】碳源:如CO2、糖类、脂肪酸等有机物,构成微生物的结构物质和分泌物,并提供能量。
氮源:如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等,主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源,又可以作为氮源,如氨基酸等。
二、无菌技术:阅读“无菌技术”,讨论回答下列问题:
(一)获得纯净培养物的关键是 ,具体操作如下:
1.对实验操作的 、操作者的 和 进行 。
2.将用于微生物培养的 、 和
等器具进行灭菌。
3.为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在 附近进行。
4.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 周围的 相接触。
(二)消毒和灭菌
1.消毒是指 。常用的方法有 、 、 消毒法。
2.灭菌是指 。常用的方法有: 、 、 灭菌。分别适用于那些用具?
实验操作大肠杆菌的纯化培养:
本实验所用的培养基是 ,本实验可分成
和 两个阶段进行。
一制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是:
、 、 、 、 。
2. 倒平板:待培养基冷却至 ℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。
其过程是:
二、纯化大肠杆菌
微生物接种:最常用的是 法和 法。另外还有穿刺接种和斜面接种等。
1.平板划线法是 的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
其操作步骤是:
最后灼烧接种环的目的是? 在第1次划线后都从上次划线末端开始的目的是?
2.稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将 进行培养。当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成的标准菌落。
系列稀释操作:
结果分析与评价
1 培养未接种培养基的作用是什么?,若有菌落形成,说明什么?
在肉汤培养基上,大肠杆菌菌落颜色?形态?
培养12h和24h后的菌落大小?;菌落分布位置?原因?
【问题生成】
同学们,通过你的自主学习,你还有哪些疑惑,请把问题填写在下面
【师生互动、问题探讨】
1、从细胞的化学元素组成来看,培养基中为什么都含有这些营养成分?〖思考2〗无菌技术除了防止培养物被污染外,还具有的目的是什么?
2、利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤,目的是什么?
3、在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中,动作要迅速,原因是什么?
溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么?
4、牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么等营养物质?
5、锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么?
6、倒平板的目的是什么?
7、若皿盖和皿底之间粘有培养基,则该平板能否培养微生物?为什么?
8、配制斜面培养基作用是什么?,试管为什么要加塞棉塞?
9、在某培养基上出现了3种特征不同的菌落是什么原因?
10、频繁使用的菌种利用什么法保存?长期保存菌种的方法是什么?
【课堂小结与反思】
【自我检测】
1、下列关于微生物营养的说法,正确的是
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