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人教版生物选修1: 5、1 DNA的粗提取与鉴定 课件
;1.DNA的粗提取与鉴定
2.多聚酶链式反应扩增DNA片段
3.血红蛋白的提取和分离;课题1 DNA的粗提取与鉴定;利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。;分离原理
不同浓度NaCl中DNA溶解度不同;;总结;(1).DNA不溶于酒精,细胞中某些蛋白质则溶于酒精。
(2).酶的专一性——蛋白酶水解蛋白质,但对DNA没有影响。
;(3).蛋白质、DNA热稳定性不同。大多数蛋白质不能忍受60-80℃的高温,而DNA在80 ℃以上才会变性。
(4).洗涤剂:能瓦解细胞膜,对DNA无影响。;3,DNA鉴定原理
在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺被染成蓝色。
;三.实验设计;2.破碎细胞,获取含DNA滤液
动物细胞(鸡血细胞)加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃杯搅拌,使其吸水涨破,过滤后收集滤液即可;
植物细胞需用洗涤剂瓦解细胞膜。如:提取洋葱的时,在切碎的洋葱中加??一定的洗涤剂和食盐,进行充分地搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。;3. 去除滤液中的杂质;酒精 ; 四. 实验注意事项
1.以血液为实验材料时,需在血液中加入柠檬酸钠防止凝固。
2.用洗涤剂处理植物细胞时动作要轻缓 ,防止产生大量泡沫 。加入酒精后用玻璃杯搅拌动作要轻缓,防止DNA分子断裂 ,不能形成絮状沉淀。
3.鉴定DNA用的二苯胺试剂要现配现用 ,否则影响实验效果。;1、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低( )
2、DNA不溶于冷酒精,可用酒精进一步提取DNA( )
3、DNA与二苯胺溶液反应生成紫色物质( )
4、酵母和菜花均可作为提取DNA的材料( )
5、向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,可见玻棒上有白色絮状物( )
6、DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝( )
;7、(2015·江苏改编)图1、2分别为“DNA的粗提取与鉴定”实验中部分操作步骤示意图,下列叙述不正确的是;解析:图1中加入蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破,释放其中的核物质,图2中加入蒸馏水的目的是降低NaCl的浓度,使DNA的溶解度降低析出,A错误;由于DNA溶于水,所以图1中完成过滤后DNA存在于滤液中,需保留滤液,B正确;图2中DNA析出,则过滤后弃去滤液,保留黏稠物,C正确;在图1中鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉,蛋白质水解形成肽和氨基酸,溶于水,有利于去除杂质,D正确。
答案:A;DNA粗提取操作中4次过滤的比较;8、“DNA的粗提取与鉴定”实验中,操作正确的是
A.取制备好的鸡血细胞液5~10 mL注入烧杯中,迅速加入物质的量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液20 mL,同时用玻璃棒沿同一方向快速搅拌5 min,可使血细胞破裂,释放出DNA
B.整个DNA提取过程中,两次加蒸馏水的目的都是为了降低溶液中NaCl的浓度,使DNA分子的溶解度达到最低,析出DNA分子
C.整个DNA提取操作中,两次加入2 mol/L的NaCl溶液,目的都是使DNA尽可能多地溶解在NaCl溶液中
D.DNA鉴定操作中,只要向溶有DNA的NaCl溶液中加入4 mL的二苯胺试剂,即可出现蓝色;解析:取制备好的鸡血细胞液注入烧杯中,迅速加入蒸馏水并用玻璃棒沿同一方向搅拌,使血细胞破裂,将DNA释放出来;整个DNA提取过程中,使用两次蒸馏水,第一次是使血细胞吸水涨破,释放DNA,第二次是用来稀释NaCl溶液,使DNA析出;在DNA鉴定操作中,DNA遇二苯胺试剂呈蓝色需在沸水浴条件下完成。
答案:C
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