暑期空课生物讲义04土壤中分解尿素的细菌的分离与计数.doc

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 教学目标 利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数。 重点与难点 对土样的选取和选择培养基的配制、对分解尿素的细菌的计数 自主预习 课题背景 尿素是一种重要的氮肥，农作物 _________（能，不能）直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为 ，这是因为细菌能合成 。 2、科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为 这样也适用于实验室中微生物的筛选，原理是 。 点评：生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用。所以通过配制选择培养基、控制培养条件等选择目的微生物。 〖思考1〗在该培养基配方中，为微生物的生长提供碳源的是 ，提供氮源的的是 ，琼脂的作用是 。 〖思考2〗该培养基对微生物 （具??，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是 。 3、在统计菌落数目时，常用来统计样品中活菌数目的方法是 。除此之外， 也是测定微生物数量的常用方法。 【补充】显微镜直接计数是测定微生物的方法。 公式：观察到的红细胞平均数∶观察到的细菌平均数＝红细胞含量∶细菌含量 4、 采用稀释涂布平板法统计菌落数目时，培养基表面生长的一个菌落，来源于 。通过统计 ，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板进行计数。 〖思考3〗从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是 。 〖思考4〗利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是 。 〖思考5〗第 位同学的结果接近真实值。你认为这两位同学的实验需要改进的操作是 。 5、统计的菌落数比活菌的实际数目 。这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是 菌落。因此，统计结果一般用 来表示。 6、设置对照的主要目的是 。 7、对照实验是指除了 的条件外，其他条件都 的实验。满足该条件的称为 ，未满足该条件的称为 组。 〖思考6〗请设计本实验的对照实验组： 。 二、实验设计 1、实验设计的内容包括 、 、 和 等。 2、根据图示2－7填写以下实验流程： 3 、土壤微生物主要分布在距地表 cm的近 性土壤中，约 为细菌。 4、分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是 ，其目的是保证获得 的平板。细菌稀释度为 ，放线菌稀释度为 ，真菌稀释度为 。 5、 培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌一般在 ℃培养1～2d，放线菌一般在 ℃培养5～7d，霉菌一般在 ℃的温度下培养3～4d。 6、在菌落计数时，每隔 h统计一次菌落数目。选取 时的记录作为结果，以防止因 而导致遗漏菌落的数目。 点评：菌种中有些菌体增殖快，有些菌体增值慢，所以培养时间要充足，使得每个菌体都能形成肉眼可观察到的菌落。 7、菌落的特征包括 等方面。 〖思考7〗土壤微生物种类最多、数量最大的原因是什么？ 土壤中营养物质含量丰富，环境条件适宜等。 8、 实验过程 1）取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要 。 2）应在 旁称取土壤 g。将称好的土样倒入盛有 mL无菌水的 中，塞好棉塞。 3）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在 旁进行。 4）实验时要对 作好标记。