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降血糖药物筛选方法;导论 动物水平筛选 细胞水平筛选 酶和受体水平筛选 总结和思考 ;糖尿病（DM, Diabetes Mellitus）;发病率;世界糖尿病日;糖尿病的事实;并发症;治疗药物;二、动物水平筛选; 链脲霉素诱导的高血压动物模型;;2）自发性糖尿病大鼠（BB大鼠）; 2.2 II型糖尿病动物模型;1）高糖高脂饮食诱发II型糖尿病动物模型;2）自发性糖尿病大鼠（PO大鼠）;3）肥胖高血糖小鼠（ob/ob小鼠）;2.3 降糖药物体内药效评价方法;葡萄糖氧化酶法（国内推荐方法）;结果： 局限：还原性物质如尿酸、维?C?、胆红素等，可 与色原性物质竞争过氧化氢，从而消耗反 应过程中所产生的过氧化氢，使测定结果偏低 举例：;血糖仪;b）糖耐量试验;方法： 实验前动物过夜禁食，灌胃给葡萄糖或蔗糖（2.5g/kg），或淀粉（3-5g/kg）。测定给糖后0 h，0.5 h，1 h，2 h???浆血糖浓度，并绘制血糖变化曲线。 结果：;c) 胰岛素释放试验;胰岛素测定方法（ELISA）： 原理：预先包被胰岛素抗体在ELISA 板上，加入样品后，样品 中的胰岛素与包被抗体结合，再加入生物素标记的抗胰 岛素单克隆抗体，结合已俘获胰岛素的另一端，最后加 入过氧化酶标记的抗生物素，生物素与抗生物素结合。 通过过氧化物酶底物显色来定量测定样品中的胰岛素。 ;方法：胰岛素测定试剂盒（wako） 组成：抗胰岛素包被板；胰岛素标准溶液；生物素标记的抗胰岛素抗体；HRP 标记的链酶亲和素；显色底物；终止液；洗涤液 试验操作：参见试剂盒说明 结果： ;图１ 哪个样品为正常，I型或 II型病人？ 图２ 哪个为治疗前或治疗后？ 图３ 哪个为治疗前或治疗后？;d) 葡糖钳技术(glucose clamp technique);方法： 大鼠麻醉 颈静脉插管 接三通管，两个进口端一侧输入10%葡萄糖，一侧输入胰岛素，出口端接静脉插管 手术完毕，输入4 mU/kg/min胰岛素，同时输入10%葡萄糖 每隔10 min测定血糖 血糖输入速率至稳态后，记录连续60 min葡萄糖输注速率 稳态下6次葡萄糖输注速率平均值为GIR， 6次血糖平均值为BG;结果：;三、细胞水平降糖药物筛选;;2. 3T3-L1脂肪细胞葡萄糖转运实验; b-细胞损伤模型 H2O2 链脲霉素 四氧嘧啶 b-细胞胰岛素分泌模型 b-细胞ATP敏感钾通道阻断剂 ;四、分子水平降糖药物筛选;α-糖苷酶有多种，包括：蔗糖酶；葡萄糖淀粉酶；麦芽糖酶；糊精酶。;方法：;4.2 蛋白质酪氨酸磷酸酶-1B (PTP-1B)抑制剂筛选;;总　结;;思考题：中药多糖会不会升高血糖？