筋骨草抗肿瘤有效部位的提取及药效学研究.doc

PAGE  PAGE 33 筋骨草抗肿瘤有效部位的提取及药效学研究 专 业：中 药 学 研 究 生：谢 学 建 导 师：吴 符 火 副教授 摘 要 目 的：通过对福建草药筋骨草（古田苦草）不同提取物，进行动物急性毒性和抑瘤实验，并对抗肿瘤的有效提取物进一步的进行药效学以及增效减毒实验，初步证实筋骨草的抗肿瘤有效部位以及有效部位的作用机理，为有效部位的提取和开发应用，提供理论基础与实验依据。 方 法：筋骨草的成分提取是用水提醇沉法，然后进行精制而得醇溶物和醇沉物，并对其成分进行初步定性鉴别；急性毒性实验：测定醇溶物和醇沉物的小鼠日灌胃（ig）最大耐受量（MTD）和半数致死量（LD50）；筋骨草醇溶物和醇沉物的抑瘤实验：选用种植S-180瘤株的小鼠，用等体积的醇溶物和醇沉物灌胃（ig），计算两者的抑瘤率，以大于30%者为有效；筋骨草有效部位醇溶物的抑瘤实验：将醇溶物配成高、中、低三种浓度的混悬液，按体重0.3ml/10g给接种后的小鼠灌胃，每日一次，以饮用水为空白。以环磷酰胺为阳性对照，隔日一次，腹腔注射40mg/kg(0.2ml)环磷酰胺。连续8天，第9天以摘眼球法取血，分离血清，测定血清中VEGF和IL-2的含量，并取瘤块、胸腺、脾脏称重，计算取出物指数；筋骨草有效部位醇溶物的减毒实验：实验设醇溶物+环磷酰胺（20mg/kg）组，用醇溶物配成所需浓度的混悬液，给接种后小鼠灌胃（ig），每日一次，并隔日腹腔注射20mg/kg(0.2ml)环磷酰胺；环磷酰胺40mg/kg组，每日给小鼠灌胃饮用水一次，隔日腹腔注射40mg/kg(0.2ml)环磷酰胺；空白组，腹腔注射和灌胃等体积生理盐水和饮用水。连续8天，第9天以摘眼球法取血，并取瘤块、胸腺、脾脏称重，计算取出物指数。测定血常规（血红蛋白HB、白细胞总数WBC）。 结 果： 筋骨草醇溶物抑瘤率大于30%，醇沉物低于30%；醇溶物混悬液的LD50是133.86g/kg；醇溶物混悬液在浓度大于1.12g/ml时，抑瘤率与空白组比较有显著性差异（P<0.01），而脾脏和胸腺的重量则无显著性差异（P>0.05），环磷酰胺组脾脏和胸腺的重量与空白组比较有非常显著性差异（P<0.01），血清中VEGF的含量无显著性差异（P>0.05），而血清中IL-2的含量与空白组、环磷酰胺组相比都有显著性差异（P<0.05）；环磷酰胺组和环磷酰胺+醇溶物组相比较，脾脏和胸腺的重量有极显著性差异（P<0.001），血常规中白细胞数、分叶细胞、淋巴细胞都有极显著差异（P<0.001），红细胞和血红蛋白无显著性差异（P>0.05）。 结 论： 初步实验证明筋骨草的有效部位为醇溶物，主要含有黄酮类物质。对S-180瘤株有显著的抑制作用，但作用强度小于环磷酰胺，有增强环磷酰胺作用，可减少环磷酰胺用量，减轻环磷酰胺毒性。醇溶物对免疫器官无损伤作用，可用于化疗时的辅助用药，能显著增强因化疗所致的白细胞以及免疫力下降。筋骨草醇溶物的抑瘤机理初步认为与提高机体的免疫力有关。 主题词： 筋骨草 醇溶物 醇沉物 黄酮类 急性毒性 环磷酰胺 S-180瘤株 抑瘤率 胸腺 脾脏 VEGF IL-2 血常规 小鼠  Experimental Studies on Extraction and Pharmacology of the Anti-tumor Effective Fractions from Ajuga decumbens In Fujian Major: Chinese Materia Medica Postgraduate: Xie Xuejian Tutor: Associate prof. Wu Fuhuo Abstract Purpose : Through animal's acute toxicity and anti-tumor and reducing toxicity and improving function experiment on different extracts of Ajuga decumbens in Fujian， it verified the anti-tumor function mechanism and effective Fraction tentatively， and offered the theoretical foundation and experiment basis for the abstraction and development for the effective Fraction. Me