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 PAGE \* MERGEFORMAT 39 分子生物学复习 第一章 绪论 1.分子生物学的概念 （广义）在分子水平上研究生命现象。即（狭义）在核酸与蛋白质水平上研究基因的复制，基因的表达（包括RNA转录、蛋白质翻译），基因表达的调控以及基因的突变与交换的分子机制。 2.DNA的双螺旋结构是由沃森和克里克发现的，PCR技术是由生物化学博士Mullis发现。 3.分子生物学在哪些方面具有广泛的应用？ 动物克隆、人类基因组工程、亲子鉴定、转基因产品、物种鉴定、疫苗和癌症检测 分子生物学的发展简史？ （一）分子生物学萌芽阶段（经典遗传学阶段）：1868年孟德尔遗传定律的发现——1910摩尔根的染色体学说； （二）分子生物学理论形成阶段：1941年比德尔和塔特姆的“一个基因一个酶”——1965年“乳糖操纵子学说” （三）分子生物学的发展阶段：20世纪70年代的遗传工程。 （四）现代分子生物学阶段：基因组测序等 请简要介绍证明DNA是遗传物质的两个经典实验 Oswald Avery(美国)：肺炎链球菌转化实验（1944年）发现转化要素（DNA）是主要的遗传物质。第一次发现遗传物质是DNA，而不是蛋白质。 （2）美国Alfred Hershey（赫尔希）发现噬菌体感染细菌时，其DNA进入了细菌体内。1969 年赫尔希获得了诺贝尔生理学和医学奖。 第二章 基因概念的演变与发展 1.经典基因的概念 性状由遗传因子控制→遗传因子在染色体上→遗传因子是DNA→一个基因一个酶→基因是顺反子。 基因是产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列，是一个具有特定功能的、完整的、不可分割的最小遗传单位即顺反子。 【经典的基因概念】基因是彼此孤立地、呈线性排列在染色体上的遗传实体。 →【负剂量效应、位置效应】染色体上的基因不是孤立的， 基因的表达受染色体状态的影响（斯特蒂文特A．H．Sturtevant，1925）。 →【等位基因、复等位基因、拟等位基因】紧密连锁，控制同一性状的非等位基因称为拟等位基因（P19）。拟等位基因是不同的两个基因。 →【顺反子】顺反子是一个具有特定功能的、完整的、不可分割的最小的遗传单位。染色体上一个区段，在一个顺反子内可以有若干个交换单位，最小的交换单位是交换子，最小的突变单位是突变子。（也就是说基因内部可以发生突变和交换） 2.顺反子 顺反子是一个具有特定功能的、完整的、不可分割的最小的遗传单位。染色体上一个区段，在一个顺反子内有若干个交换单位，最小的交换单位是交换子，最小的突变单位是突变子。 鉴定方法：顺反实验(P21) 杂合的双突变体有两种不同的排列形式：顺式排列和反式排列(图8－2)，顺式排列是指两个突变座位在同一条染色体上，反式排列是两个突变座位在不同的染色体上。顺反测验就是根据顺式表现型和反式表现型来确定两个突变体是否属于一个基因或顺反子。 如反式排列表现为野生型，说明这两个突变分别属于两个基因位点，(非等位基因)；如表现为突变型，则说明两个突变属于同一个基因的不同座位，即等位基因（顺反子）。 顺式有功能而反式没有功能时，突变位点在同一顺反子内； 顺式有功能而反式也有功能时，突变位点在不同顺反子内。 3.DNA双螺旋模型 ① 脱氧核苷酸之间通过3’,5’磷酸二酯键连接，形成螺旋体的磷酸骨架； ②两条链的碱基以氢键连接，并遵循A-T，C-G配对原则； ③双螺旋中任意一条核酸链绕纵轴旋转一周所升降的螺距为3.4nm，其中包含10个碱基对，每对碱基对之间相距0.34nm。 ④双螺旋形成一个大沟和一个小沟，其中大沟往往是基因表达调控的重要位点。小沟是染料或生物素结合位点。 4.为什么RNA不如DNA稳定？在紫外线下的吸光值更大？ 因为由于DNA的核糖 2’位没有自由羟基的缘故，使得DNA非常稳定。而且RNA是单链结构，DNA是双链双螺旋结构，双螺旋以氢键缔合，而RNA的碱基和氢键暴露在环境中，易与其他物质发生化学反应，且容易被核酸酶降解。由于碱基暴露在外，所以比DNA具有更强的紫外吸收值 5.什么是DNA的变性与复性，这一特性有什么应用？ DNA变性是碱基对之间的氢键发生断裂，两条核苷酸连逐渐彼此分离形成无规则线团的过程，而复性是指DNA溶液在逐渐降温的条件下，两条核苷酸链的配对碱基间又重新形成氢键，恢复到天然的DNA双螺旋结构的过程。DNA的复性和变性是PCR技术中的核心原理，以及根据不同DNA的变性和复性条件不同分离DNA或提纯。 影响DNA变性的因素影响DNA复性的因素1. DNA分子的碱基组成：G+C含量越高， Tm越高； 2. DNA分子的碱基排列： G+C含量相同时，A/T集中分布， Tm减小（比如：启动子部位）； 3. DNA片段大小：片段短的DNA,其Tm小； 4