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6第六章 营养器官培养

第六章 营养器官培养;器官培养(Organ culture ) : 主要指植物根、叶、茎、花、果实等器官在离体条件下,在无菌的人工环境种做进一步培养发育,最终长成幼苗的过程。 特点:能保持它们所具有的特征性结构,通过器官培养可快速大量地繁殖。; 根培养的意义: 1) 是进行根系生理、代谢研究的最优良实验体系; 2) 是研究器官分化、形态建成的良好体系; 3)可建立快速生长的根无性系。; 离体根生长迅速、代谢活跃。 在离体根培养中,自然条件下生长在土壤中的根要解决消毒问题,是非常困难的,常用无菌苗的根作为培养材料。;根无性繁殖性的建立 离体根的无性系: 由单个直根衍生,并经继代培养而保持遗传性一致的根的培养物。; 培养基:;培养过程 举例:番茄根的培养过程;影响离体根生长的因素;根培养的分化途径;第二节 茎的培养 ; 茎 培养的意义;茎段培养过程;举例:苞舌兰茎段的培养;举例:怀山药茎段的培养途径: 不定芽途径:MS+ 2mg/L KT+1~2mg/LPP333 + 0.02mg/L NAA,20天后从边缘突起部位形成3~5个不定芽,40天成苗。 愈伤组织:MS+6mg/LBA+ 0.02~2mg/LNAA上,培养7天后在切口处形成白色愈伤组织。 茎段分化的途径与NAA浓度有关。 NAA由0.02mg/L到2mg/L,愈伤组织形成率由50.3%提高到82.5%,绿苗形成率由25%下降到7.1%。 后来证实,在NAA低浓度培养基中,通过茎切段直接成芽的频率较高;而在NAA浓度高的培养基中,通过愈伤组织形成芽的频率较高。;举例:影响月季茎段增殖培养的因素 1)腋芽在茎段上的位置。 在无激素培养基上,23天后,接近枝条最顶端和基部的芽发育最慢,而枝条中部的芽发育最快。 2)去茎顶端的作用。 继代培养时切去嫩茎的顶芽后,促进嫩茎的增殖。 3)嫩茎长度对形成多芽苗的影响。 1-10 mm,形成多芽苗最有效,侧枝数也较多, 切割过短(小于1mm)或过长(11-15mm)都对茎的增殖不利。;4)植物生长调节剂的影响。 植物生长抑制剂三碘苯甲酸促进嫩茎增殖。 6-BA 1-3mg/L促进茎增殖有效,浓度高会减少茎的伸长,也对下一步生根起抑制作用。 1 mg/L 6-BA+1mg/L NAA,虽然使茎的增殖略有降低,但可使茎伸长。 赤霉素抑制月季茎的增殖。;第三节 叶的培养;叶培养的意义:;叶原基;番茄子叶培养;举例:长寿花实生苗的叶片的离体培养 叶片?诱导愈伤组织?不定芽?生根培养?移栽 培养基:MS+1mg/L 2,4-D+0.1mg/L BA 30天边缘出现淡绿色颗粒状突起,形成质地致密的淡绿色愈伤组织。 继代培养后,获得大量愈伤组织。 将愈伤组织切成0.5cm×0.5cm,接种到MS+ 1mg/LBA +0.1mg/LNAA上,15天后愈伤组织明显转绿和增大; 50天左右产生绿色芽点并陆续分化出芽,每块愈伤组织可分化出5~6株无根苗, 1/2MS培养基上,全部长出不定根。;叶离体培养直接形成不定芽结构;复习思考题: 1.茎段培养与茎尖培养有何区别? 2.茎段培养的含义、意义及实质是什么? 其大致步骤怎样? 3.叶片培养大致过程如何?

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