《细胞工程》第四章-动物细胞培养工程4.pptVIP

细胞工程;Chapter 4、动物细胞培养工程 ;4．5 动物细胞培养过程的 放大与优化4．5．1 动物细胞培养工艺的研究;;4．5．2 动物细胞培养工艺的优化;4．5．3 动物细胞培养工艺的放大;4．6 动物细胞代谢工程;B、代谢控制发酵 （metabolic control fermentetion） ——是指利用遗传学或生物化学方法，人 为地在DNA分子水平上改变和控制微生物 的代谢，使目的产物大量的生成、积累的 发酵； C、在代谢控制发酵的理论基础上，提出 和形成了“代谢工程”概念；;;4．6．2 基本原理;;4．6．3 代谢调节的基本类型及其机制;;4．6．4 代谢工程的研究方法 ;;4．7 动物细胞工程产品制备及质控 ;4．7．2 动物细胞工程产品的质量控制 ;4．8 动物细胞工程表达产品的应用 ;;; A、组织型纤溶酶原活化剂（t-PA）突变体 Tenecteplase，商品名TNKaseTM， 急性心肌梗死病人溶栓治疗， 人t-PA基因位于8号染色体p12-q11.2， 全长36594bp，14个外显子，13个内含子， t-PA由527个氨基酸，单链糖蛋白，开始 酵母表达，不能分离纯化 t-PA突变体，由双链糖蛋白， 现用CHO细胞高效表达成功（参见下图） ;;B、β-干扰素（IFN-β） ; 天然IFN-β——刺激体外培养人成纤维细胞， 大肠杆菌表达，活性低，不稳定， Cys17形成二硫键，缺少N-Met，无糖基化 重组IFN-β 点突变改造，使Cys17变为中性氨基酸， 如：丝、酪氨酸，商品名为：IFN-β-1b CHO细胞表达，与天然一样，天然糖基化， 分离简单。 ;C、新型红细胞生成刺激蛋白（NESP） D、血友病 ——缺少凝血因子Ⅶ（FⅦ）或含量过低疾病;;4．8．2 MAb药物（参见下图） ;;;;4．8．3基因工程与亚单位疫苗 ;A、乙肝疫苗（参见下图） ;;B、艾滋病疫苗（参见下图） ;;C、肿瘤疫苗 ;;（Zevalin泽娃灵是世界上第一个放射性标记的单克隆抗体，2002年在美国上市，被批准用于难治复发B细胞非霍奇金淋巴瘤的治疗。） ;4．8．4 基因治疗产品 ;A、神经系统疾病的基因或细胞治疗： ;;B、造血干细胞治疗癌症 HSC基因（参见下图） ; 胰岛素依赖型（I） C、细胞、基因 代谢 治疗糖尿病 紊乱 非胰岛素依赖型（II） ;【习题】 1、名词解释，并简要说明它们间关系： 　　单抗与疫苗 悬浮培养与贴壁培养 流加工艺与灌流工艺 CHO与HNK tPA与EPO（NESP）艾滋病疫苗与肿瘤疫苗 　　基因治疗与细胞治疗 CNTF与HSC 2、简述乙肝疫苗发展历程？试规划肝癌疫苗的 发展策略？