布病的实验室诊断选编.pptVIP

布鲁氏菌病概况;全球布鲁氏菌病疫情;*;*;*;Amsterdam, The Netherlands www.kit.nl;WHO人布鲁氏菌病的诊断检测;布鲁氏菌病病原学;布氏菌可被碱性染料着色，如革兰染色为阴性，姬姆莎染色呈红色，布氏菌对染料吸收缓慢;布鲁氏菌的分离培养;自动培养仪和培养瓶;疑似布鲁氏菌时：抽取菌液少许，接种到血琼脂培养基中，进行纯培养。要求一定生物安全柜内操作！ 生化反应进一步鉴定： 自动化设备 ;培养特性;布氏琼脂布鲁氏菌菌落;;布氏菌生化鉴定;借助VITEK2COMPACT全自动微生物分析系统建立了一套布鲁氏菌的生化鉴定参考标准分型方法。 完善布鲁氏菌生化鉴定数据库。 鉴定布鲁氏菌速度快，可靠性高，确定布鲁氏菌属的鉴定指标为L-脯氨酸芳胺酶（ProA）、酪氨酸芳胺酶（TyrA）、尿素酶（URE）、氨基乙酸芳胺酶（GlyA）；区分羊种布氏菌的指标为ELLMAN （ELLM）；区分牛种布氏菌的指标为乳酸盐产碱（1LATK）；区分猪种布氏菌指标为丙氨酸-苯丙氨酸-脯氨酸芳胺酶（APPA）. 当鉴定为人苍白杆菌时，需与布鲁氏菌进行鉴别。;;;冻干机设备;菌种保存管;BCSP31-PCR;M DL2000 DNA Ladder1。B. melitensis 2. B. abortus 3. B. suis 4. B. ovis 5. B. neotomae 6.B. canis ;AMOS-PCR 鉴定布氏菌种; 19株标准菌株AMOS-PCR扩增结果 ;750bp 500bp 250bp ;多重PCR(Bruce ladder);;中国分离株的基因型分布;布鲁氏菌血清学检测;Amsterdam, The Netherlands www.kit.nl;虎红平板凝集试验;虎红玻片凝集试验（RBT）;全血玻片凝集反应;玻片凝集的评价;RBT 注意事项;试管凝集(莱特试验);;;试管凝集(莱特试验);试管凝集(莱特试验);试管凝集(莱特试验);试管凝集(莱特试验);方法与临床： 1、该法特异性较好，敏感性较高，适用于检疫和临床诊断 2、由于该方法有时出现前带现象和封闭现象，所以有时出现阴性结果，必要时和其他方法联合应用 ;试管凝集检测 Standard Tube Agglutination Test;SAT 注意事项;当实验室活动涉及传染或潜在传染性生物因子时，应进行危害程度评估。 危害程度评估应至少包括下列内容：生物因子的种类（已知的、未知的或未知传染性的生物材料）、来源、传染性、致病性、传播途径、在环境中的稳定性、感染剂量、浓度、动物实验数据、预防和治疗。 危害程度评估应由适当的有经验的专业人员进行。;;注：;布鲁氏菌感染途径;感染事件;感染事件;存在的问题; ;布鲁氏菌病血清学实验的生物安全;布鲁氏菌病病原学实验生物安全; 生物安全设备 ; 生物安全设备;良好的内务行为;内务行为改变时应报告实验室负责人，以确保避免发生无意识的风险或危险。 实验室行为、工作习惯或材料改变可能对内务和/或维护人员有潜在危险时，应报告实验室负责人，并书面告知内务和维护人员的管理者。 应制定在发生事故或漏出导致生物、化学性污染时，设备保养或修理之前对设备去污染、净化和消毒的专用规程。 ; 离开微生物实验室前，脱掉工作服后，应进行手的清洗。离开生物安全2级和3级实验室时，脱防护服后再次用肥皂及流水冲洗手。 消毒可使用0.3～0.5%碘伏消毒液或快速手消毒剂，如新洁尔灭醇、75%医用酒精或60%的异丙醇等3—5ml擦于手指、手掌、手背，揉搓1～3分钟。 ;谢谢大家!