金属硫蛋白MT在农业动物养殖业中的应用研究进展.doc

金属硫蛋白（MT）在农业动物养殖业中的应用研究进展 薛元勋，孙建华，王 慧* (山东省山东农业大学动物科技学院，山东，泰安，271018) 摘 要：金属硫蛋白（MT）是一类广泛存在于生物中的低分子量、富含金属和半胱氨酸，且能被金属或其它因素诱导生成的金属结合蛋白。是一种具有天然生物活性的物质，具有广泛的生物学功能，其主要作用是：参与微量元素的储存、运输和代谢，重金属解毒，清理自由基，拮抗电离辐射，增强机体的免疫力和抗应激等，参与DNA的复制、转录和能量代谢的调节过程。因此，MT对提高动物的抗应激能力和健康生长，以及提高畜产品的质量等都具有重要意义。另外，MT还可作为模型系统，应用于基因表达调控和基因工程研究领域。本文综述了MT的结构、代谢特点、生物学功能和在养殖业中的应用，启示金属硫蛋白在养殖业中具有诱人的应用前景；MT在临床、重金属中毒与环境监测、临床应用和功能食品等方面也将有广阔的应用前景。 关键词：金属硫蛋白；养殖业；抗应激；诱导生成；应用前景 金属硫蛋白(Metallothionein，MT)也称为金属硫氨酸甲基内盐，在正常生理条件下，金属硫蛋白主要是Zn或Zn、Cu结合蛋白，主要存在于动物的肝脏、肾脏、胰脏和小肠中，是一类低分子量、富含半胱氨酸、可被金属诱导的特异蛋白质。1957年哈佛大学的Margoshes和Valee等在研究马肾脏蓄积镉的过程中首次发现并分离出MT，此后，在真核微生物、高等植物、原核生物等均发现有MT存在并能被分离出来。在1997年的第四届国际MT会议上，被发现并确定氨基酸序列的MT共有170多种。MT是一种具有天然生物活性的物质，具有广泛的生物学功能，涉及生物有机体的生长、发育、生殖、衰老、肿瘤发生、免疫、应激等各个方面。其主要作用是：参与动物体内微量元素的储存、运输和代谢，解除重金属的毒性，清理体内自由基，拮抗电离辐射，增强机体的免疫力和抗应激能力，参与DNA的复制、转录和能量代谢的调节过程。因此，MT在提高动物的抗应激能力、健康生长和提高畜产品的质量等方面具有十分重要的作用。近年来，对MT的研究和应用已经涉及到农业、医药、保健、生物工程、环境保护等诸多领域。MT的重要作用和应用价值逐步被重视，这为防治心血管疾病、遗传性疾病、风湿及类风湿疾病、抗肿瘤和抗衰老研究提供了新的途径。对MT抗氧化和抗应激方面的研究尤其显示出了开发和利用金属硫蛋白的诱人前景。 1．金属硫蛋白的结构特征 金属硫蛋白（MT）的化学名称为金属硫组氨酸三甲基内盐，是一种小分子的金属结合蛋白质。一般而言，哺乳动物的MT的相对分子质量为6000～7000道尔顿，去金属后的硫蛋白(thionein)的相对分子质量为6000道尔顿左右。其多肽链一般含有61～62个氨基酸残基，其中半胱氨酸（Cys）含量较高，有20个之多；有6～8个Lys，7～10个Ser，但不含芳香族氨基酸。哺乳动物中存在4种MT异构体，即MT-Ⅰ、MT-Ⅱ、MT-Ⅲ和MT-Ⅳ。其中MT-Ⅰ和MT-Ⅱ，存在于各种器官中；而MT-Ⅲ在脑组织中；MT-Ⅳ仅发现在鳞状上皮组织中。诱导后，肝MT-Ⅰ和MT-Ⅱ主要结合锌，肾MT-Ⅰ和MT-Ⅱ主要结合镉、铜或锌；MT-Ⅲ和MT-Ⅳ主要结合锌和铜。MT的氨基酸序列高度保守，“Cys—X—Cys”三肽序列是所有MT的特征序列。MT结合金属的能力较强，一般含有4～12个金属，通过硫酯键与蛋白质结合并具有特征光谱，MT结合各种金属的能力顺序由高到低依此为：Hg(II)Ag(I)Cu(I)Cd(II)Zn(II)。 MT中的金属可以被脱去，脱去金属的硫蛋白在低pH值时较稳定。MT中的Zn在pH3.5～4.5时能迅速释出，Cd在pH2.5～3.5时释出；而Cu在酸性条件下则形成Cu的不溶性聚合MT。因此，MT的存在形式及其稳定性与它是否结合了金属、所结合金属的种类以及环境的酸碱度（pH）密切相关。 2．MT的可诱导合成特性 MT的合成具有高度的可诱导性，可被多种因素诱导。 李丽立等的实验表明，高剂量的锌能诱导MT在杜长大三元杂交猪肝脏内大量合成，最佳累计锌诱导剂量为330mg／kg。在对家兔的诱导实验中也得到了相似的结果，诱导后兔肉、血浆、肝、肾、肺和小肠中的MT含量与对照组比较均有显著的提高(P0.05)。张建鹏等和柴春彦等的研究表明，同一剂量下锌诱导MT合成效果比铁和铜诱导MT合成效果好，比镉和银诱导MT合成效果差，但镉和银诱导合成的Cd-MT和Ag-MT结合比较牢固，其它金属不能置换Cd-MT和Ag-MT中的Cd和Ag，因而不能起到重金属解毒的功能。而锌诱导生成的Zn-MT能被多种金属置换，在重金属解毒方面起着重要作用；同时结合在MT中的Zn还能够行使其它生物学功能，因此,锌被公认为最安全、最有效的MT诱导剂。 MT的合成也可通过激素