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11DNA重组技术的基本工具教案
专题一 基因工程
第一节 DNA重组技术的基本工具
[教学目标]
1.通过学习DNA重组技术的基本工具,模拟制作重组DNA模型,初步掌握基因工程的基本方法提高动手能力
2.通过对书中插图、照片等的观察,学会科学的观察方法,培养观察能力。
3.通过对基本概念、基本原理、科学方法的正确理解和掌握,逐步形成比较、判断、推理、分析、综合等思维能力,具备能运用学到的生物学知识评价和解决某些实际问题的能力。
[教学重难点]
1.限制性内切酶的功能
2.黏性末端和平末端
3.DNA连接酶与DNA聚合酶的区别
4.载体必须具备的条件
5.质粒与质体的区别、常用的载体
[教学过程]
一、基因工程的概念:
基因工程的别名基因拼接技术或DNA管理费用技术操作环境生物体外操作对象基因操作水平DNA分子水平基本过程剪切——拼接——导入——表达结果人类需要的基因产物
二、基因操作的工具
1、“分子手术刀”又叫基因剪刀——限制性内切酶
来源:主要从原核生物中分离纯化,如细菌。另外霉菌也有。
本质:蛋白质
作用部位:磷酸二酯键
作用特点:专一性,即识别特定的核苷酸序列,切割特定的切点。
结果:产生黏性末端(碱基互补配对)或平末端。
播放投影幻灯片的实例。
限制酶切割DNA分子示意图
C
︱
G
A A T T
G
︱
C
T T A A
︱ ︱ ︱ ︱
黏性末端
T T A A
G
|
C
C
︱
G
A A T T
2、“分子缝合针”又叫基因针线——DNA连接酶
本质:蛋白质
作用部位:磷酸二酯键。DNA连接酶作用示意图
C
︱
G
A A T T
G
︱
C
T T A A
︱ ︱ ︱ ︱
两个相同的黏性末端的连接。
③★两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较:
区别:E.coIiDNA连接酶来源于大肠杆菌,只能使黏性末端之间连接;
T4DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端之间的效率较低。
★DNA连接酶与DNA聚合酶作用的比较
DNA连接酶DNA聚合酶不同点连接的DNA双链单链模板不要模板要模板连接的对象2个DNA片段单个脱氧核苷酸加到已存在的单链DNA片段上相同点作用实质形成磷酸二酯键化学本质蛋白质
3、“分子运输车”又叫基因的运输工具——基因进入受体细胞的载体
作用:作为运载工具,将外源基因送入受体细胞。
在宿主细胞内对目的基因进行大量复制和稳定保存。
作为载体必须具备的条件:
能在宿主细胞内复制并稳定地保存。
具有多个限制酶切点。
具有某些标记基因,以便重组后进行重组DNA的鉴定和筛选。
对受体细胞无害。
种类:质粒、噬菌体和动植物病毒。
基因工程中最常用的运载体:质粒
特点:
质粒是一种裸漏的、独立于细菌拟核DNA之外,能自我复制的小型环状DNA分子;
质粒的大小只有普通细菌染色体的1%左右;
存在于许多细菌及酵母菌等微生物中;
质粒的存在对宿主细胞生存没有决定性的作用;
质粒的复制只能在宿主细胞内完成。
(自身细胞中也可)
课堂小结:基因工程的概念和的基本操作工具。
课后记:
本节课主要学习基因工程的基本概念和基因工程的基本操作工具,学生能充分利用自己查找和老师提供的教学资料进行学习探究,效果较好。但学生在质粒的认识上还有待进一步提高。下节课应重新启发学生复习有关知识,提高学生的认知能力。
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