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2016届高三生物一轮复习(word版资料)选修3现代生物科技专题
第一讲基因工程
eq \a\vs4\al(对应学生用书,P222)
[循着图示·想一想]
知识点一 基因工程的基本操作工具
知识点二 基因工程的基本操作程序
知识点三 蛋白质工程
[结合题目·试一试]
判断下列叙述的正误
(1)切割质粒的限制性核酸内切酶均能特异性地识别6个核苷酸序列(2014·江苏卷T23-A)(×)
(2)载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因(2014·江苏卷T23-C)(×)
(3)抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达(2014·江苏卷T23-D)(√)
(4)设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列(2013·江苏卷T6-A)(×)
(5)用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列(2013·江苏卷T6-B)(√)
(6)PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶(2013·江苏卷T6-C)(×)
(7)外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制(2013·安徽卷T6-B)(×)
(8)每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点(2011·浙江卷T6-B)(√)
(9)蛋白质工程可以合成自然界中不存在的蛋白质(√)(2011·江苏卷T14-A)
(10)将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada(2011·浙江卷T6-C)(×)
(11)限制性核酸内切酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶(×)
(12)E·coli DNA连接酶既可连接平末端,又可连接黏性末端(×)
(13)目的基因导入双子叶植物一般采用农杆菌转化法(√)
(14)为培育抗除草剂的作物新品种,导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体(×)
(15)检测目的基因是否导入受体细胞可用抗原—抗体杂交技术(×)
(16)蛋白质工程的目的是改造或合成人类需要的蛋白质(√)
(17)蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作,定向改变分子的结构(×)
(18)由大肠杆菌工程菌获得人的干扰素后可直接应用(×)
eq \a\vs4\al(对应学生用书,P223)
考点一︱基因工程的操作工具
[必备知能]
1.限制性核酸内切酶
(1)识别序列的特点:呈现碱基互补对称,无论是奇数个碱基还是偶数个碱基,都可以找到一条中心轴线,如图,中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。如eq \o(\s\up7(GCGC),\s\do5(CGCG))以中心线为轴,两侧碱基互补对称;eq \o(\s\up7(CCAGG),\s\do5(GGTCC))以eq \o(\s\up7(A),\s\do5(T))为轴,两侧碱基互补对称。
(2)切割后产生末端的种类——黏性末端和平末端。
①黏性末端:是限制酶在它识别序列的中轴线两侧将DNA的两条链分别切开时形成的(错位切),如下图所示:
②平末端:是限制酶在识别序列的中轴线切开时形成的(平切),如下图所示:
2.限制酶与DNA连接酶的关系
[易误提醒]
关于工具酶的五个注意点
(1)限制酶切割位点所处的位置必须是在所需的标记基因之外,这样才能保证标记基因的完整性,有利于对目的基因的检测。
(2)为使目的基因与载体形成相同的DNA片段末端连接,通常使用同一种限制酶将二者切割,但如果不同的限制酶切割DNA分子所产生的末端也存在互补关系时,则两末端也可连接。
(3)限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。
(4)限制酶是一类酶,而不是一种酶。
(5)DNA连接酶起作用时,不需要模板。
3.载体具备的条件
条件目的稳定并能复制目的基因稳定存在且数量可扩大有一个至多个限制酶切割位点可携带多个或多种外源基因具有特殊的标记基因便于重组DNA的鉴定和选择
4.基因工程的理论基础
[必明考向]
考向 基因工程的操作工具
1.(2012·江苏高考)下图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题:
(1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由_______________________连接。
(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,产生的末端是________末端,其产物长度为________________________________________________________________________。
(3
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