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ELISA技术在畜牧业中的应用进展 武文君，张 映*收稿日期：2012-01-11 作者简介：武文君(1988-)，女，山西太原人，硕士研究生，研究方向为分子免疫学。 *通讯作者：教授，硕士生导师，E-mail： HYPERLINK mailto:dkyzy@126.com dkyzy@126.com。 ，方礼禄 ，张 凤 ( 山西农业大学 动物科技学院，山西 太谷030801 ) 摘 要：酶联免疫吸附试验具有操作简便、快速准确、特异性高、敏感性强、易于标准化等优点，已广泛应用于临床医学、生物化学、分析化学、食品安全监测、环境污染控制、畜牧业等领域。文章综述了绍酶联免疫吸附试验在畜牧行业中的应用进展。 关键词：ELISA；畜牧业；检测；农药；疾病 The Application Progress of ELISA in Animal Husbandry WU Wenjun, ZHANG Ying*, FANG Lilu, ZHANG Feng (College of Animal Science and Veterinary Medicine, Shanxi Agricultural University, Taigu 030801, Shanxi China) Abstract: Enzyme-Linked Immunosorbent Assay has the advantages of fast, simple operation, highly accurate and specific, strong sensitivity and easy to standardization. ELISA has been widely used in clinical medicine, biological chemistry, analytical chemistry, food safety monitoring, environment pollution control, animal husbandry, etc. This paper recommended the application progress of ELISA in animal husbandry industry. Key words: ELISA; animal husbandry; detection; pesticides; disease 酶联免疫吸附试验(ELISA)不仅用于测定抗原，还用于测定抗体。Elisa有3种试剂是必需的：固相的抗原(抗体)、酶标记的抗原(抗体)和酶作用的底物。依据试剂的来源、标本的性状及检测的条件，可将ELISA技术分为六种类型：双抗体夹心法，是检测抗原最常用的方法；双位点一步法，是在双抗体夹心法的基础上改良的一种方法（如基于单克隆抗体的ELISA）；间接法测抗体，是检测抗体的最常用方法；竞争法，不仅用于测定抗原，也用于测定抗体；捕获法；应用亲和素和生物素的ELISA。 1 ELISA的原理 ELISA 的三条基本原理：抗原（或抗体）吸附于固相载体表面，并保持抗原（或抗体）的免疫学活性；抗原（或抗体）能与酶连接形成酶复合物，这种酶复合物依然有免疫学和酶学活性；酶复合物与相应抗原（或抗体）结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定??否存在免疫反应，并且颜色反应的深度与标本中相应抗原（或抗体）的量成正比例，因此，可依据底物显色的程度来判定试验结果。ELISA法是一种敏感及特异的方法，与经典的分析方法相比，其敏感度更高、更快更方便、经济上更实惠。 2 ELISA技术在畜牧业中的应用 由于ELISA具有快速、敏感高、简易、易于标准化、特异性强、污染少等优点，已广泛应用于畜牧业的动物饲料农药残留测定、疾病诊断、畜产品安全检测、环境污染控制等。 2.1 动物食物中农药残留及畜产品药物残留的测定 农药残留会对畜牧业的安全产生威胁，并间接威胁人的健康。Loomans建立的ELISA方法可同时检测牛奶中的庆大霉索、卡那霉素和新霉索[1]。此外，还可用ELISA检测DES及其他禁用激素类如乙炔雌二醇、甲基睾酮、去甲基睾酮等[2]。Qian等研发出一个对甲基毒死蜱有机磷杀虫剂，检测具有高敏感度的基于单克隆抗体的ELISA[3]。Kumar等研发检测甲基对硫磷农药的自动化ELISA系统，比人工或其他检测方法的敏感度要高且结果更精确[4]。Wang等研发的检测有机磷农药的生物素-亲和素酶联免疫（BA-ELISA）与传统的ELISA相比，尽管其交叉反应没有发生改变，但其敏感度更高、应用范围更广[5]。Zhang等研发出检测水果中的有机磷杀虫剂的倍硫磷具有高敏感度的ELISA[6]。Xu等研发出基于单克隆抗体的直接竞ELI