基因工程中常用载体的性质及其Ti质粒的转化机理.pdf

————————————————?!!!!!!!!!!!!!R弧!!!猒——?!!!!!!!!!!!!!!?!!!!!!!R灰弧!R?，．‘；；；●?瑀，：??膃如?穜???，吐?．?鞡—基因工程中常用载体的性质及其?质粒的转化机理；?，?，●?琁?琲??铮唬??蛎蟪闠??，??只????衋“，??—?篒·％?罷’??背?，?鴒???騛唧?辨?瓵???錷???瑃??复?和埽????．??．?：?????胁籼?．???????呲?删?鵬从，??弛?＆?????：?????【??鯰，??吼?．?柏．?Ⅱ??叫，?????∞??。??曲鲥咄．??飄?，??，?????¨?狣???培：??????Ｓ弥柿Ｔ靥宓闹掷?《食品工业科技》?????夺秓?襤???????：?????．?????琂蚰嚣?，?????脚?????畇??轚????，??增刊?，?鶰’??琈?隨—?№日?????琈?墨?柚．?????????琺??鏳?抽培???瓻叮?岫打??????餭?ЭЭА??岫?膅?璊??箧ゞ???琫????柚前盲白??年以来植物基因工程发展迅速，在植物抗病毒、抗虫、抗除草剂和品种改良等方面基因工程载体的构建、细胞的基因转化、转化细胞的组织培养和植株再生，到外源基因的表达检测手段等都已形成了相当成熟的技术，被广泛目前，已有下列几类载体用于基因工程中：质粒???：是一个经过多次改造?，且???的顺序己全部测定，容易分析插入的顺?詁??．???贺稚非周泽扬李洪军陈宗道?髂吓┮荡笱?称房蒲аг????都取得了举世瞩目的成就。从植物基因的分离、应用与生产实践中。而建成的人工质粒，???集中了几种天然质粒的优点：分子量小，总长为?????阯．??阣?????????山??“?籨???眦?瑂????Ⅱ????湖?面???吡?????硼．??一∞??聉?眃删????叫????廿??聍??雊?眦??荨?胁?甈?玁?駻????．?：???????。?∞??叩??????謉关键词???蒬??????耐???????椰?????—?????籑?甒???—???撕??．??騟印????口一??叩?基岗??坛Ｓ迷靥錞?柿Ｗ;???，，●????．????鹴???盯????“???３猨鲥??∞?Ⅳ?????????????豱??粕??．?Ⅱ?，??印??耡?????В??????：??—???礸比?????????舶???，???：??????鑣??：?????夺?籇????ⅰ甈???????：???衄一???蔍???????玪?幅??疭??痥?．???????疊???且一??，??????????．??，?：??????瑂?．???蝧?????Ⅱ??甧??，?積—?????：???????耹???玎??％????，??簂??????緄??．?甐????．????，???????????—??靉????癮??廿????????～???緇??????????????：????????觭???瓹????●??，‘÷‘?●，●：?：．。． 是?。它已被普遍用作向动物细胞‘食品工业科技》????鷇??霰砀瞬芙榈嫉奶呆鹱;???????盯???增刊序及做酶切图谱，属松驰性复制控制，在两的状态下能通过伤口感染植物，导致植物发生冠个抗性基因上都有若干个可用来克隆外源??瘿瘤?隈ú?。人们对根瘤农杆菌的研究是从的单一切点，所以使用很方便。适合做大肠植物的冠瘿病开始。??年．???等在根瘤杆菌载体的质粒。农杆菌体内发现一种与植物肿瘤发生有关的质粒夺噬菌体?簒噬菌体是双链???即?质粒，从此揭开了研究根瘤农杆菌的序幕；??年，?订???猛?凰乇昙堑腡??苗体颗粒中，??窍咦此?捶肿樱?粒做探针时发现．加入高浓度的烟草肿瘤细胞分子两端各有?个碱基的单链互补后，?质粒??母葱运俣扔屑涌斓那魇疲??粘性末端。?删?逶靥迥芸寺〗洗?明肿瘤细胞中有?质粒的顺序。以后进一步的分子杂交证明植物肿瘤细胞的基因组中存在根瘤夺科斯质粒????：???质粒就农杆菌?质粒的一个片段，称其为转移是含有?承晕舶偷闹柿＃?笤?～??。克隆的真核基因??纱锏??有微生物的遗传物质。根瘤农杆菌?质粒肠杆菌后，??チ幢桓粗瞥伤?吹?复制型，可以从细胞中分离出来做为??寺〉脑靥濉?动物病毒?”：?”??9布郾蘸?环状的??????龊塑账嶙槌桑?分为早期区和晚期区，在这两区之间含有病毒??母粗破鹗夹蛄小Ｉ鲜?四种载体都只能转化原核细胞，是由于真核细胞中没有类似质粒的附加体存在，在真核病毒载体中研究最多的引入外源基因的载体。这些载体在大小和结构上差异悬殊，但其共宿主细胞中自律复制。易于从宿主细胞中分离提纯。?⒄庑┰靥搴?幸恍┒运?窃谙妇?性鲋?并非必须的???危?宓勒庑┣?蔚耐庠碊?．可以象载体的正常组分一样进行复制和增殖。?质粒的结