一株海绵附生菌 Bacillus firmus 的培养条件优化及α-GI 活性成分初步分析.pdfVIP

第 ３４ 卷　第 ２ 期 应 用 海 洋 学 学 报 Ｖｏｌ．３４，Ｎｏ．２ 　２０１５ 年 ５ 月 ＪｏｕｒｎａＩ ｏｆ ＡｐｐＩｉｅｄ Ｏｃｅａｎｏｇｒａｐｈｙ Ｍａｙ，２０１５ 一株海绵附生菌 Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓ 的培养条件 优化及 α-ＧＩ 活性成分初步分析 邱晶晶１ ，査鑫篧１ ，姜　薇１，２ ，靳翠丽１，２ ，周晓见１，２ （１．扬州大学环境科学与工程学院，江苏 扬州 ２２５１２７；２．扬州大学海洋科学与技术研究所，江苏 扬州 ２２５１２７） 摘要：为寻找新型 α-葡萄糖苷酶抑制（α-ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ，α-ＧＩ）活性化合物来源，针对前期研究 发现的具有 α-ＧＩ 活性的海绵附生微生物坚强芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓ），对其发酵培养条件进行优 化，并对其活性组分中主要成分进行初步分析．以 α-ＧＩ 活性为主要检测对象，选出蛋白胨、酵母膏、 ＮａＣｌ 和 ｐＨ 值共 ４ 个因素进行正交优化试验．结合菌株生长情况和代谢产物产量指标，发现在 ＭＢ 培养基的基础上，蛋白胨质量浓度 ３ ｇ ／ｄｍ３ 、酵母膏质量浓度 ３ ｇ ／ｄｍ３ 、ＮａＣｌ 质量浓度 １９．５ ｇ ／ｄｍ３ 、 ｐＨ 值为 ７．５ 的组合为最优培养条件．在优化后的培养条件下，规模化发酵该菌株，提取其代谢产物 粗提物，经活性追踪下的二次色谱柱分离，获得一个高抑制活性组分，抑制率达 ８２．４％．该组分经 ＧＣ-ＭＳ 分析后发现，活性组分中主要成分为环二肽类及哌啶酮类物质．本研究结果为寻找新型 α- ＧＩ 活性化合物提供了一个新的、可扩大生产的来源． 关键词：海洋生物学；海绵附生菌；坚强芽孢杆菌；代谢产物；α-葡萄糖苷酶抑制活性 ＤＯＩ：１０．３９６９ ／Ｊ．ＩＳＳＮ．２０９５-４９７２．２０１５．０２．００８ 中图分类号：Ｐ７３５ 文献标识码：Ａ 文章编号：２０９５-４９７２ （２０１５）０２-０２０２-０７ 　　地球上的生命源于海洋，海洋亦是地球上环境 物中分离到的大环内酰胺类化合物 Ａｌｔｅｒａｍｉｄｅ Ａ 被 生物资源多样性最丰富的区域．由于海洋生物的生 证明具有显著的抗肿瘤细胞活性［７］；从海绵 Ｐｅｎａｒｅｓ 存环境可能具有高压、高盐、缺氧、遮光等特殊性，海 ｓｐ．中分离到的 Ｐｅｎａｒｏｌｉｄｅ ｓｕｌｆａｔｅｓ Ａ１ 和 Ａ２ 都具有 洋生物的多样性也明显高于陆地及淡水生物．同时， 较强的 α-葡萄糖苷酶抑制（α-ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ， 由于生物进化和适应环境的原因，海洋生物次生代 α-ＧＩ）活性［８］．而且，生物测试指导下的活性化合物 谢产物与陆地生物相比，结构更新颖，生物活性更多 提取、分离和筛选技术越来越多地应用于海绵共附 变，从而具有更大的资源开发价值［１-４］． 生微生物，研究者每年均新报道上百种和海绵共附 海洋微生物在海洋中的分布最广泛，物种丰富， 生微生 物 有 关 的 新 化 合 物 或 已 知 化 合 物 的 新 活 其代谢过程和代谢产物的类型也相对繁多．在众多