丙型肝炎病毒全长基因嵌合萤光素酶重组质粒转染细胞系的建立与初步应用.pdfVIP

丙型肝炎病毒全长基因嵌合萤光素酶重组 质粒转染细胞系的建立与初步应用 徐洪涛 肖丽 咸建春 陈亚宝 ?????摘 要 ???目 的??构建 能 产生 较高 效 价重 组病 毒 的???细胞 感染 模 型， 为???致病机制的研 究 和 抗病 毒药 物 的筛 选提 供 一个 有效 的 体外 细胞 培 养系统。方法??利 用???技术 在?????????? 端插入海肾萤光素酶????????????????????，?????报告基因，并引入能提高???效价的突变?酶切鉴定 重组 基因序列构建成功 后，转染入肝癌细胞系??????，用细胞免疫荧光、免疫印迹法和萤光素酶活 性 分 析检测病 毒复制和感染水平。 用???α 鉴定该系统用于抗丙 肝药物筛选的可行 性。结果??在 重 组 病毒 ??????????????????转 染的 细 胞中 可检 测 到????的 活 性， 而阴 性对照????????和野 生 株 ???????????转 染 的细 胞未检 测到????的活性， 经连续传代，???????????????????转染细 胞所 产生的病毒效价可 达到???× ??????????，????的活性随着???α浓度的增加而逐渐减低，呈 现 明 显的剂量 依赖特性。结论??构 建的重组?????????????报告 基因系统具有经济 、快速、敏感 等优点，为抗???药物的筛选提供了有利平台。 肝炎病毒，丙型；萤光素酶类；基因，报告；细胞，培养的；质粒 ???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ??????????????????????????????????????? ??????????? ??????? ????????????????????????? ??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ????????????????