流式细胞仪-12.16探索.ppt

  流式细胞仪简介;流式细胞仪;流式细胞仪的发展简史;流式细胞仪的组成;BD FACSJazz;流式细胞仪的工作原理;;(一)液流系统;;(二)光路系统-激光光源与光束形成系统;;(二)光路系统-光学系统;“=;;（三）电系统-信号检测与分析系统;流式细胞仪可检测到的细胞参数;前向角散射光 ——FSC;侧向角散射光——SSC;散射光能被用来区分不同细胞群体的基本形态上的差异 - 通常使用“散点图”来看散射光信号 - 散点图上的一个点就代表一个细胞颗粒的数据; 荧光强度（FL）：细胞上的荧光染料被激光激发后发射出的荧光，不同的荧光染料其发射波长不同。 有荧光标记的细胞与无荧光标记的区分开来（阴阳） 高FL细胞与低FL细胞区分开来（强弱） 一般的流式细胞仪只装有一个激光光源（488nm），可测出三个FL，即FL1、FL2、FL3，大型的流式细胞仪装有两个或三个激光光源（488nm、633nm和325nm），可测出6个FL。 ;荧光检测器; 定量染色 荧光信号大小 被标记组分含量的定量 多荧光标记胞内多种组分，实现多参数测量;;流式细胞仪数据分析;;;外周全血细胞散射光双参数点图;等高图和密度图分析;三维图分析;细胞结构 细胞大小 细胞粒度 细胞表面面积 核浆比例 DNA含量与细胞周期 RNA含量 蛋白质含量 染色体分析;细胞凋亡研究;PI单染色法;图中2N代表G0/G1期细胞，4N代表G2/M期细胞，两者中间代表S期细胞。这是以2倍体和4倍体细胞为主的流式DNA图 在G0/G1峰前出现一个亚二倍体峰，即凋亡峰。 由于细胞凋亡以后， DNA裂解成小片段后， PI染色量相应减少，形成亚二倍体峰。;PI-Annexin V双染法;;;文献资料;谢谢观赏