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- 2017-04-23 发布于四川
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研究生基础实验技能培训
研究生科研实验教学基地建设基本实验技能培训;;1.DNA的提取
DNA提取原理
DNA提取方法
操作注意事项;1.1 基因组DNA提取原理;仪器准备:
台式离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计、移液器、离心管(灭菌)、吸头(灭菌)、镊子(灭菌)、离心管架
试剂准备:
试剂盒、无水乙醇等;试剂盒;试剂盒内容;操作步骤(重点);操作步骤(重点);计算公式:
OD260/OD280=1.7-1.9
DNA浓度(ug/ul)=OD260×50×稀释倍数/1000
OD260=0.1
稀释倍数=250
DNA浓度=0.1×50 ×250/1000=1.25 ug/ul;操作注意事项;2.PCR
PCR体系和循环条件
PCR操作步骤
操作注意事项;仪器准备:
PCR仪,微型离心机、移液器、离心管(灭菌)、吸头(灭菌)、镊子(灭菌)、离心管架
试剂准备:
ddH2O, PCR Buffer,dNTP,引物,PCR聚合酶,DNA模板;2.1 PCR体系和循环条件(重点);60 ℃,
30s;2.2 PCR操作步骤(重点);2.3 PCR操作注意事项;3.琼脂糖凝胶电泳
凝胶电泳原理
电泳方法步骤
操作注意事项;3.1 琼脂糖凝胶电泳原理;配置1%的胶:称1g琼脂糖于适当大小三角瓶中,倒入100ml的1*TAE,微波炉加热至完全融化;
待凝胶温度降至50-60度
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