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新型树突状细胞疫苗的构建及功能的初步鉴定.pdf
318 Tianjin Med J, Apr 2011, Vol 39 No 4
doi:10.3969/j.issn.0253-9896.2011.04.012
新型树突状细胞疫苗的构建及功能的初步鉴定 *
霍 佳 杨莉莉 魏 枫 于津浦 李 慧 任秀宝△
1 SOCS1 B1 HMGB1
摘要 目的：构建可同时实现沉默细胞因子信号抑制因子 （ ）、高迁移率族蛋白 （ ）刺激和肿瘤
DC SOCS1 HMGB1 NY-ESO-1
相关抗原负载的新型树突状细胞（ ）疫苗。方法：构建沉默 并共表达 及肿瘤相关抗原 的
p/shS1-NY-IRES-sig- HMGB1 DC p/shS1-NY-IRES-sig-HMGB1 DC
质粒（ ）。体外诱导单核细胞分化为 ，将 转染入 细
shNC/GFP p/shS1-NY-IRES-sig-HMGB1 PCR Western blot
胞。同时设立未转染组、 转染组和 转染组。 和 验证基因及蛋白
ELISA DC TNF -α IL -12 IL-1 IL-6
表达后，酶联免疫吸附（ ）法检测 细胞分泌的肿瘤坏子因子（ ） 、白细胞介素（ ） 、 及 的变
PCR p/shS1-NY-IRES-sig-
化。结果：经测序证实所构建质粒序列与预期序列一致，酶切和 验证质粒结构正确。成功将
HMGB1 DC NY-ESO-1 HMGB1 SOCS1 shRNA
转染入 细胞，并在基因和蛋白水平验证 的正确表达， 可在胞浆内表达。
shS SOCS1 p/shS1-NY-IRES-sig-HMGB1 DC TNF-α IL-12 IL-1 IL-6
质粒 可??默 表达。 转染组 、 、 及 分泌量较未转染
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