實验二 红细胞比容测定 红细胞脆性的测定 血红蛋白测定.pptVIP

实验二 红细胞比容测定 红细胞脆性的测定  血红蛋白测定 ; 离心后血液分层 layer after blood centrifugated ;方法与步骤; [注意事项] 选择抗凝剂必须考虑到不能使红细胞变形、溶解。本实验采用柠檬酸钠抗凝。 血液与抗凝剂混合、注血时应避免动作剧烈引起红细胞破裂。 温氏分血管内壁要充分干燥。血液进入毛细管内的刻度读数要精确，血柱中不得有气泡。;三、血红蛋白的测定 目的 掌握用比色法测定动物的血红蛋白的含量。 原理 血红蛋白的颜色常与氧的结合量多少有关。但当用一定的氧化剂将其氧化时，可使其转变为稳定、棕色的高铁血红蛋白，而且颜色与血红蛋白（或高铁血红蛋白）的浓度成正比。可与标准色进行对比，求出血红蛋白的浓度，即每升血液中含血红蛋白克数（g·L-1）。;方法与步骤;具体测定方法如下： ①用滴管加5～6滴，0.1mol·L-1 HCl到刻度管内,(约加到管下方刻度”2”或10%处)。 ②用微量采血管吸血至20μl，仔细揩去吸管外的血液。 ③将吸血管中的血液轻轻吹到比色管的底部，再吸上清液洗吸管3次。操作时勿产生气泡,以免影响比色。用细玻棒轻轻搅动，使血液与盐酸充分混合，静置10 min，使管内的盐酸和血红蛋白完全作用，形成棕色的高铁血红蛋白。; ④把比色管插入标准比色箱两色柱中央的空格中。 ⑤使无刻度的两面位于空格的前后方向，便于透光和比色。用滴管向比色管内逐滴加入蒸馏水，并不断搅匀，边滴，边观察、边对着自然光进行比色，直到溶液的颜色与标准比色板的颜色一致为止。 ⑥读出管内液体面所在的克数，即是每100 ml血中所含的血红蛋白的克数。比色前，应将玻棒抽出来，其上面的液体应沥干净，读数应以溶液凹面最低处相一致的刻度为准。换算成每升血液中含血红蛋白克数（g·L-1）。;【注意事项】