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胸膜肺炎放线杆菌血清1型Apx IA N-端多肽免疫原性的确定及表达该多肽
胸膜肺炎放线杆菌血清1型Apx IA N-端多肽免疫原性的确定及表达该多肽
的血清7型重组菌株的构建;汇报提纲;一、研究背景;无活性的毒素蛋白产生过程; ( Bei etal, 2005 FEMS Microbiology letter);研究背景;二、研究内容、结果与分析;（一） 胸膜肺炎放线杆菌血清1型Apx毒素I的N-端多肽免疫原性研究;1. apxIA全长基因的克隆序列测定 ;2.apxIA基因及其编码蛋白的生物信息学分析 ;ApxIA的三个区域的免疫原性预测 ;3.apxIA 5’端1140bp编码区的克隆序列测定 ;4.pET-IA及pET-IA5的诱导表达及Western-blot分析 ;5.天然毒素ApxI的提取及SDS鉴定;6.间接ELISA检测免疫小鼠血清的抗体水平;7.溶血中和抗体的检测结果;8.小鼠攻毒保护试验结果 ;ApxIA的免疫原性预测 ;N端多肽的溶血中和作用 ;（二）表达N-端多肽的胸膜肺炎放线杆菌血清7型重组菌株的构建 ;1. apxIIC基因的克隆及序列分析 ;2 重组转移质粒的构建;包含有apxIIC基因及??源右臂的引入;同源左臂的替换 ;apxIA 5’端1140bp片段的引入;内部缺失180bp pSKPP△C载体的构建 ;nptⅡ-SacB 表达盒的引入;3.负向选择方法筛选突变株;w.t;4. 讨论;未筛选到突变株的原因 ;1.自发抗性现象的发现及原因分析 ;未筛选到突变株的原因 ;未筛选到突变株的原因 ;试验改进的方向 ;试验改进的方向 ;试验改进的方向 ;试验改进的方向 ;四、 小结与展望;小结与展望;硕士期间发表论文;致 谢;敬请各位提出宝贵意见！;比较AHC40嵌合毒素与绵阳血红细胞以及HL-60细胞之间的相互作用
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