植物组织中水势的测定选编.ppt

植物组织水势的测定 ;水势表示水分的化学势； 水从水势高处流向低处； 植物体细胞之间，组织之间以及植物和环境之间的水分移动方向由水势差决定（流速和方向）。; 植物组织水势（和渗透势）的测定方法： 液相平衡法－小液流法、重量法；质壁分离法。 所需仪器设备简单，但手续繁琐、效率低，难以自动记录。 压力平衡法－压力室法。 适于测定枝条或整个叶片的水势，对于小型样品叶圆片等 则无能为力。 气相平衡法－热电耦湿度计法、露点法。 能广泛用于各种植物叶片水势和渗透势的测定，所需样品 量极少、测量精度高，是近年来发展起来的一类较好的植 物水势及其组分的测定技术。;一、液体交换法测定植物组织水势 （小液流法）;组织失水，外液浓度变小；ψw植物 ψS; 3、根据外液浓度的变化情况即可确定与植物组织相同水势的溶液浓度。 根据以下公式计算出溶液的渗透势，即为植物组织的水势。 ; 溶液渗透势的计算： ψS=﹣iCRT 式中 ψS—溶液的渗透势，以MPa为单位； R＝0.008314MPa·L·mol﹣1·K﹣1 T—绝对温度，即273+t℃； C—溶液的质量摩尔浓度，以mol·kg －1 H2O为单位 i－溶液的等渗系数，CaCl2可用2.6。;（二）实验材料 大叶黄杨叶片（取叶片8－10个，随去随用，不要带枝条？）;试剂： CaCl2溶液： 0.05，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5 mol·kg-1H2O 甲烯蓝粉末; 取干燥洁净的试管12支，分成甲、乙两组。 甲组试管中分别加0.05～0.5 六种浓度的溶液之一各0.5ml（量准确？）。用一只移液器 低 高。 乙组试管加入6种浓度的CaCl2溶液各4ml，用一只移液器 低 高。4ml需要很准确吗？ 4. 甲、乙两组试管分别塞上相应的橡皮塞备用。 为什么盖橡皮塞？; 5. 选取均匀一致的植物叶片8～10片（勿水洗！），打取叶圆片60余片，甲组试管内各加入叶圆片10个，使叶片浸入溶液，盖上橡皮塞，平衡20min以上。期间多次摇动试管，以加速水分平衡。 6. 染色：在甲组每一试管中用??剖针放入微量甲烯蓝粉末，摇匀，溶液变蓝。（干燥针头先用蒸馏水湿润，加入的甲烯蓝量一定少）;7. 观察液滴升降： 用毛细管取甲组试管有色液 乙组试管中部 液滴位置？观察液滴升降并记录。 ;;毛细管放置稳定;毛细管放置稳定;8. 分别测定不同浓度中有色液滴的升降，找出与组织水分势相当的浓度，根据原理公式计算出组织的水势。;;溶液浓度;溶液浓度;溶液浓度;溶液浓度;溶液浓度;加样器的使用;注意事项： 1. 所取材料在植株上的部位要一致，打取叶圆片要避开主脉和伤口。 2. 取材以及打取叶圆片的过程操作要迅速，以免失水。到实验材料生长处操作。 3. 甲烯蓝易吸附在试管壁上，先用水洗刷，再用铬酸洗液浸泡。， 铬酸洗液回收，可以重复使用。; ;二、露点法测定植物组织水势 ; ; 测量时，先给热电偶施加反向电流，使样品室内的热电偶结点降温，当结点温度降至露点温度以下时，将有少量液态水凝结在热电偶结点表面，此时切断反向电流；; 停止外加电流后，热电偶结点温度因热交换平衡而很快上升；但是，当到达露点温度时，因表面水分蒸发带走热量，降温，从而使其温度保持在露点温度，呈现短时间的稳衡状态。;室温; 待结点表面水分蒸发完毕后，其温度将再次上升，直至恢复原来的温度平衡。 记录露点时的稳衡状态的温度，便可将其换算成待测样品的水势或渗透势。 ;HR-33T-R型露点微伏压计 ; ;;露点微伏压计操作方法 ;干旱叶片平衡时间延长;打开主机电源;（1）打开主机电源开关。将℃/μV开关置于“μV” 位置。 （2） 将C-52探头连接到插口上。 注意：在连接和拔出C52探头时FUNCTION开关处在 “SHORT” 位置上。 ;严禁手握插头连线插拔探头;（3）按下Πv按钮，调节Πv SET旋钮使表头指针达到C52连接线上标注的Πv值。;（4）将量程（RANGE）旋钮放在预期的位置上（通常在30位置），FUNCTION旋钮