海产动物胚胎学实验指导2007.doc

PAGE  PAGE 11 海产动物胚胎学 实验指导 实验一 蛙卵、胚胎切片观察 实验目的：通过蛙卵、蛙胚胎发育切片的观察，让学生掌握胚胎发育的基本过程和概念。 实验器材：显微镜、蛙胚胎发育各时期切片 实验步骤：按顺序观察蛙的胚胎发育过程： 蛙卵； 2. 2细胞期；3. 4细胞期；4. 8细胞期； 5. 囊胚期； 6. 原肠期； 7. 神经胚期； 8. 蛙胚3mm装片。 受精卵期是从卵受精到第一次卵裂沟出现为止。一般在受精后5～10 min，出现动物极朝上，植物极朝下，该现象称为翻正。通常蛙胚的动物极呈棕黑色，植物极呈乳白色，但少数蛙类的胚胎色素少，翻正后不易区分动植物极。 2细胞期从第1次卵裂沟出现到第2次卵裂沟出现为止。经裂，卵裂沟从动物极开始，向植物极延伸，裂后形成两个大小几乎相等的分裂球。 4细胞期从第2次卵裂沟出现到第3次卵裂沟出现为止。经裂，并垂直于第一次卵裂面，形成四个大致相等的分裂球。 8细胞期从第3次卵裂沟出现至第4次卵裂沟出现为止。经裂或纬裂，如果是经裂，裂沟基本上平行于第1次裂沟而垂直于第2次裂沟，如虎纹蛙、棘胸蛙和花臭蛙；如果是纬裂，裂沟则偏于动物极，裂后形成上下两层共8个分裂球，如黑斑蛙和其他大多数蛙类。 16细胞期从第4次卵裂沟出现至第5次卵裂沟出现为止。纬裂或经裂，第3次卵裂为纬裂者，第4次卵裂则为经裂，反之亦然。裂后形成上下两层共16个分裂球，位于动物半球的分裂球小于植物半球的分裂球。 32细胞期从第5次卵裂开始至囊胚早期开始。经裂或纬裂，各细胞分裂开始不同步且不规则，裂后的分裂球排列均不一致。 囊胚早期经多次卵裂后，分裂球的数目增多且体积逐渐变小，胚胎表面呈高低不平，细胞界限清楚，随着囊胚腔的形成及扩大，胚胎的直径开始变大，但并不明显。 囊胚晚期细胞继续分裂，体积更小，数目更多，细胞界限不明，胚胎表面光滑。 原肠早期在赤道板附近的地方出现唇形凹陷，其背侧即为背唇。 原肠中期由于动物极细胞分裂的速度较植物极细胞快，所以处于背唇位置的动物极细胞分裂后形成下包之势，将植物极逐渐包入，植物极细胞就逐渐内卷，背唇向两侧扩展加深，形成半圆形的侧唇，并继续延伸直至形成一圈为止，即形成圆形胚孔，位于胚孔位置的卵黄被称为卵黄栓。 随着动植物极细胞的继续外包和内卷，胚孔逐渐变小，卵黄栓也随之缩小，直至最后被包入。 神经板期的胚体纵轴开始伸长，背部变为平坦并逐渐形成一前宽后窄的勺状神经板，其狭小部分与原口相连接。 神经褶期的胚体继续伸长，从神经板前端两侧开始隆起并向后延伸形成神经褶，中间凹陷形成浅而宽的神经沟。 胚胎转动期也称神经沟期，此时两侧神经褶逐渐向中间合拢，神经沟变深而窄，直至愈合形成神经管为止。??? 此时胚胎表面出现纤毛，纤毛的摆动使胚胎转动，但有些种类由于胚体较大，转动微弱，暂未出现可见性胚胎转动，如虎纹蛙。 从神经管出现至尾芽形成为止为神经管期。神经褶完全愈合形成神经管，前端两侧出现感觉板和鳃板雏形，胚体纵轴继续延长。 尾芽期是从尾芽翘起至肌肉效应出现为止。尾芽明显翘起并伸长，鳃板更加明显，肾原基出现并逐渐明显，肌节出现，鳃板有明显凹陷而分二叶，视泡也较明显。 肌肉效应期是从肌肉效应开始至心脏开始跳动为止。身体逐渐伸长，尤其尾部，肌节明显，胚体若受机械或强光刺激，躯干及尾会左右扭动，口部略呈窝状，出现吸盘雏形。 心脏跳动期是从心脏开始跳动至鳃血循环出现为止。鳃板形成明显的两对外鳃，肌节增多，视泡更明显，在胚胎的头部和躯干部之间可见心脏微微搏动。 鳃血循环期是从鳃丝内出现血液循环至开口为止。此期大部分胚胎孵化出卵胶膜，侧卧水底，有时在水中可作短距离的螺旋状游动，每侧外鳃两对，每对外鳃各分出许多鳃丝，口窝加深，鳃丝内有血液作脉冲式流动。 开口期口内的口板膜穿通，口呈裂缝状，角质颌开始形成但通常还未出现色素。眼的角膜透明，黑色的视杯显露，外鳃的鳃丝伸长。 尾血循环期在尾部与腹部交界之处可见到微弱的血液循环，并且随着胚胎的发育，血液流动愈来愈明显，颌齿雏形出现，眼珠明显，蝌蚪能作长距离游泳。 鳃盖褶期在每侧外鳃基部出现皮肤褶子，并逐渐向腹面会合形成一条完整的肤褶，即鳃盖褶，晶体明显，肠管形成，口吸盘开始退化，身体及尾部的色素增加，尾长占全长的一半以上。 右鳃封闭期时，右侧外鳃丝逐渐缩短，直至被鳃盖褶所遮盖，口部移向吻端，出现黑色角质颌，肠管出现1～2圈弯曲。 鳃盖完成期时的特点是，左侧外鳃完全被鳃盖褶所封盖，留下一个小孔，称出水孔，眼能自由转动，口吸盘退化消失，口能开闭自如，肠管卷曲成2～3圈。 作业： 绘图：蛙卵、2细胞期、囊胚期、原肠期、神经胚期、3mm胚体期  1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9.