红螺疣螈早期胚胎发育的研究.doc

初审通过（编号2010-0945），负责编辑：张兰 红瘰疣螈胚胎发育的初步观察 杨国辉1 * 杨自忠1 李孟然2 王志强2 宋宇3 （1大理学院农学与生物科学学院 2、大理学院2005级生物本科班 3、大理学院2007级生物本科班 671003） 摘要:报道红瘰疣螈 (Tylototrion shanjing Nussbaum,Brodie,et Yang 1995)的胚胎发育过程。根据胚胎发育过程中的形态变化规律将胚胎发育过程分为22个时期,在室温(21±1)℃的条件下,胚胎发育历时20-22天。描述了各时期的形态特征,并讨论了发育中的一些现象。 关键词: 红瘰疣螈；胚胎发育;观察 Early Embryonic Developm of Tylototrion shanjing Abstract: The early embryonic development of Tylototrion shanjing Nussbaum Brodie,et Yang 1995,was studied.The course of embryonic development, from its fertilized egg to the Later forelimb bud, is divided into 22 stages, which took 20-22 days under the room temperature of (25±1)℃.In the presentpaper the appearance characteristic of each period is described and some phenomena regarding embryonic growth are discussed. 　Key words: Tylototrion shanjing Nussbaum ;embryonic development; observation 红瘰疣螈 (Tylototrion shanjing Nussbaum,Brodie,et Yang 1995)，隶属有尾目（Caudata）、蝾螈科（Salamandridae）、疣螈属(Tylototriton)，在我国主要分布云南中西部地区，广西有少量分布【1-2】，1998年被列为国家二级重点保护野生动物【3】。 目前, 国内外有关红瘰疣螈的研究较少，国内仅对其染色体及皮肤分泌物的进行过研究，德国的Thomas Ziegler等对它的幼体形态发育进行过描述【4-6】，对于红瘰疣螈的早期胚胎发育的研究却未见报道。本文参照国内学者对有尾两栖类胚胎发育的研究方法【7-11】,对该物种进行了早期胚胎发育的初步观察,以期为今后的科研和物种保护提供参考资料。 1 材料和方法 本研究所用材料采集云南省大理市苍山西坡斜阳峰宝林箐，时间选择在红瘰疣螈繁殖季节（5-7月份）。采集红瘰疣螈带回实验室内盛水鱼缸中,观察其自然产卵情况,产卵时间一般在晚上20—23时之间。产卵完成后马上将卵泡中乳白色受精卵取出放入盛有净化自来水的5-8个培养皿中, 培养皿直径12 cm,水深2cm,每皿放20个左右受精卵,定时取5-10个胚胎用解剖镜观察。本实验一共观 * 云南省应用基础研究面上项目(2009CD092)资助察了6批受精卵的发育,记录各期发育时期的时间(以50%以上的胚胎出现某时期特征为准)，并从各期中取5-10个胚胎,在5%的福尔马林溶液中固定用Nikon体视镜进行数码拍照，并用软件进行卵径和胚长的测量，本文以活体观察描述。 2　结果 胚胎各期的划分参考东方蝾螈所拟定的分期方法【12】,从受精卵发育到前肢芽末端分成三叉共分为22个时期,现将各期胚胎主要外部形态特征、记录时间和各期胚胎的直径或胚体长描述如下(表1、2图1)。 表1　红螺疣螈早期胚胎发育 发育时期  主要特征 室内温度 (25±1℃)从受精卵起各期间隔时数（min)卵径或胚长(mm) 受精卵期自卵产出后受精至第1次卵裂沟出现为止。卵粒平均直径为2.5mm左右,刚产下的卵不分上下,受精后约30 min受精卵翻正,动物极向上,约占卵表的2/5左右,植物极向下,受精卵呈乳白色,动物极颜色约深于植物极。卵膜吸水膨胀,卵子与卵黄膜间略有间隙。 02.43+0.41士0.112细胞期第一次卵裂，从动物极开始经裂形成一条纵向的卵裂沟，渐渐延伸入植物极直至将胚体分割成两部分。2342.50+0.374细胞期第二次卵裂，从动物极开始，经裂形成一条卵裂沟，与第一次卵裂的卵裂沟相垂直，形成一交叉的“十字形”，将卵分成4个分裂球。