98抗生素微生物限度检查操作规程综述.doc

四川利君精华制药股份有限公司GMP管理文件 题 目抗生素微生物限度检查操作规程共11页文件编号JH-CZ-ZL-098-ROO第1页制 定 人审 核 人批 准 人制定日期审核日期批准日期生效日期版 本 号R00颁发部门质量部分发部门质量部、QC室、质量部负责人颁发数量03文件编写/修订历史：本次为企业新定。 1 目的：利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用，比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑制圈的大小，以测定供试品效价。 2 范围：适用于本公司生产的抗生素类产品成品的含量测定。 3 职责： 3.1 QC：负责执行。 3.2 QC主任：负责检查。 3.3 质量部经理：负责监督。 4 依据：《药品生产质量管理规范》（2010年修订）。 5 内容： 5.1 管碟法为国际通用的方法，我国药典抗生素微生物检定法也一直采用管碟法。 抗生素管碟测定法是利用抗生素在摊布特定试验菌的固体培养基内呈球面形扩散，形成含一定浓度抗生素球形区，抑制了试验菌的繁殖而呈现出透明的抑菌圈。此法系根据抗生素在一定浓度范围内。对数剂量与抑菌圈直径（面积）呈线性关系。通过比较标准品与供试品产生抑菌圈的大小，计算出供试品的效价，抗生素效价以“单位（u）”或“微克（ug）”表示。 5.2 仪器与用具: 5.2.1操作室 光线明亮，操作室应分为两部分。彼此分开；一部分为一般操作间，一部分为半无菌操作间。半无菌操作间，设有紫外线灯达到空气消毒。应装有空调设备，控制室温在20～25℃。操作台可用稳固的水泥台，台面用玻璃板垫平，用水平仪校准，保持水平。室内注 四川利君精华制药股份有限公司第2页 共11页题目抗生素微生物限度检查操作规程文件编号JH-CZ-ZL-098-ROO版本号：R00意抗生素的污染。 5.2.2 双碟 为硬质玻璃或塑料培养平皿，内径约90mm，高16～17mm，碟底厚均匀水平，无气泡。碟底平度检查，可将双碟放在水平台上，下垫一张白纸，碟内加水2～3ml，再滴加蓝墨水，观察蓝色深浅是否一致。用过的双碟经高压灭菌倒出培养基后，置玻璃仪器专用洗液或其它清洗液中浸泡过夜，冲洗，沥干，置150～160℃干热灭菌2小时或高压121℃蒸气灭菌30分钟，备用。 5.2.3 陶瓦盖 内径约103mm，外径108mm，平坦，吸水性强，应定期干燥、清洗。 5.2.4 钢管 内径（6.0±0.1）mm，高(10.0±0.1)，外径(8.0±0.1)或（7.8±0.1）mm，每套钢管重量差异不超过±0.05g，内外壁及两端面光洁平坦，管壁厚薄一致。每次使用后应置1：100新洁尔灭溶液内，浸泡2小时以上，进行灭菌后再行洗涤，先用水洗涤，超声波超声30分钟或用沾有去污粉的纱布条串擦内外壁，冲洗，淋干，再用蒸馏水冲洗3次后，置带盖的容器内，150～160℃干热灭菌2小时备用。 5.2.5 钢管放置器 置于半无菌操作间内，有6孔和4孔两种，钢管下落时应垂直平稳、位置正确，双碟升降平稳。应保持清洁，防止抗生素污染。可定期用75%乙醇棉擦拭，并用乙醇棉火焰烧小孔。置钢管的玻璃管定期干烤灭菌。恒温培养箱 隔水式为宜，35～37℃及24～26℃，隔板上可备有带孔的玻璃板并垫平。 5.2.6 灭菌刻度吸管 吸取菌液及培养基用。试验用后应立即置5%石炭酸或1：100新洁尔灭溶液中消毒后再按玻璃容器常规洗涤。吸口处塞入脱脂棉（应松动，透气），置适宜容器中，120℃以上干热灭菌2小时或121℃蒸气灭菌30分钟, 烘干备用。 5.2.7 玻璃容器 包括滴定管、移液管、刻度吸管、容量瓶等，按“玻璃器皿检定规程”进行标定，要符合一等品规定，每次应用前用清洁液浸泡，水冲洗、蒸馏水冲洗3次，淋干。 四川利君精华制药股份有限公司第3页 共11页题目抗生素微生物限度检查操作规程文件编号JH-CZ-ZL-098-ROO版本号：R005.2.8 称量瓶 具塞，重量在10g以下。用完后，先用水冲洗、淋干。置清洁液浸泡2小时以上，水洗、蒸馏水冲洗3次，置洁净的大平皿中，在120℃干热3小时，待冷至70～60℃时，取出置于干燥器中备用。 5.2.9 毛细滴管 用玻璃管拉制，管口光滑。应用前清洁液浸泡、水冲洗、蒸馏水冲洗3次，置适宜容器中，在120℃干燥 3小时后备用。 5.2.10 分析天平，感量0.1mg；抑菌圈直径（面积）测量仪 5.2.11 可用ZX－300A型或CHB型抑菌圈面积测量仪及适当的测试仪。仪器必须按抑菌圈测量仪检验规程检验，符合规定者方能应用。 5.2.12 游标卡尺 精度0.05mm，长度125mm。 5.2.13 超净工作台 用于菌种的接种或传代。超净工作台须置洁净工作室或半无菌室内。 5