动物细胞工程二.ppt

; ;动物细胞融合与单克隆抗体;三、动物细胞融合;思考题;细胞A;动物细胞融合;灭活病毒诱导细胞融合的原理：;用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程;6.你推测一下动物细胞融合有哪些方面的应用吗？;2、诱导动物细胞融合的方法;动物细胞融合;主要用于制备;思考： 1.抗体是由何种细胞产生的？ 效应B细胞（浆细胞）。 2.一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种抗体吗？ 每一个Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。;提 问; ; 1.概括单克隆抗体的概念 ;实验目的:制备单克隆抗体. 实验原理： 实验材料：小白鼠 实验器材：培养皿、针筒等等。 实验过程：？ ;（1）设计方案： 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞－－能够无限增殖 ;;;（1）为什么用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合？ ;1、因为B淋巴细胞具有分泌特异性抗体的能力，而骨髓瘤细胞具有在体外培养条件下大量增殖的本领，所以由某种B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合产生的杂交瘤细胞，能够在体外大量繁殖，并且产生特定的单克隆抗体。;3、拓展：聚乙二醇处理后，培养液中存在哪几种细胞？;已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断，人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂交瘤细胞，请回答：（1）试管中除融合的杂交瘤细胞外，还有_____________种融合细胞。（考虑两两融合）（2）设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出杂交瘤细胞，并说明原理。　　方法： 原理：;解析：　　（1）试管中有人的淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞，在促溶剂的作用下，可能出现以下3种细胞的融合情况，人的淋巴细胞和淋巴细胞融合，小鼠的骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞融合，人的淋巴细胞和小鼠的骨髓瘤细胞融合，实验需要的是第3种细胞，即杂交瘤细胞；　　（2）要将杂交瘤细胞分离出来，可以在培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖的细胞；加入氨基嘌呤后，使D合成途径阻断，仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞中可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖。;某同学根据杂交瘤技术的方法，设计了一个生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答： （１）该方案能达到预期效果吗？ （２）图中②为　　　 过程，常用　　　　 　　　　　作为诱导剂。该细胞继承了　　　　　　　　　 因此不仅能分泌　　　　　　，还 有　　　　　　　　　 的本领。;单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是 （ ） ①B淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A．①②③④ B．①③⑤ C．②④ D．①③ ;3.单克隆抗体的应用：;用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”，灵敏度很高，在妊娠第8天就可以做出诊断，比原来的诊断方法提前了10天左右，可以避免孕妇在不知道妊娠的情况下因服用药物而对胎儿造成不利影响。该方法检测的准确率在90％以上。;;总结;教学反馈;B;课后习题;3.“生物导弹”是指 （　 ） A.单克隆抗体 　　　　　　　　 B.杂交瘤细胞 C.产生特定抗体的B淋巴细胞　　 D.在单克隆抗体上连接抗癌药物 ;三.思考与探究 1.植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同？ 2.制备单克隆抗体时，为什么要选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞？;教学参考;2.为什么不用两个而要用多个细胞进行动物细胞间的融合？;3.如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？;;;单克隆抗体是指 （ ） A．单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体 B．单个B淋巴细胞增殖产生的抗体 C．单个杂交瘤细胞增殖产生的抗体 D．单个抗体通过克隆化，产生大量抗体 ;（江苏高考题，2003）将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是（多选） （ ） A．B淋巴细胞可以产生