1229黄曲霉检验方法标准.pdf

黄曲霉检验方法标准 黄曲霉毒素（AFT）是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香 豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉(aspergillusflavus) 寄生 曲霉 (a.parasiticus) 产生的次生代谢产物，在湿热地区食品和饲料中 出现黄曲霉毒素的机率最高。B1 是最危险的致癌物，经常在玉米， 花生，棉花种子，一些干果中常能检测到。它们在紫外线照射下能产 生荧光，根据荧光颜色不同，将其分为 B 族和 G 族两大类及其衍生 物。AFT 目前已发现 20 余种。AFT 主要污染粮油食品、动植物食品 等；如花生、玉米，大米、小麦、豆类、坚果类、肉类、乳及乳制品、 水产品等均有黄曲霉毒素污染。其中以花生和玉米污染最严重。家庭 自制发酵食品也能检出黄曲霉毒素，尤其是高温高湿地区的粮油及制 品种捡出率更高。 常用检??方法对比： 1 免疫亲和柱-荧光分光光度法和免疫亲和术-HPLC 法 黄曲霉毒素免疫亲和柱-高效液相色谱法比传统的 HPLC 法更加 安全,可靠,灵敏度和准确度高.它采用单克隆抗体免疫技术,可以特效 性地将黄曲霉毒素或其他真菌毒素分离出来,分离效率和回收率高， 是一种准确定性定量的首选方法。 分析原理试样中的黄曲霉毒素用一定比例的甲醇/水提取液经过 过滤,稀释后,用免疫亲和柱净化 ,以甲醇将亲和柱上的黄曲霉毒素淋 洗下来,在淋洗液中加入溴溶液衍生,以提高测定灵敏度,然后将甲醇- 黄曲霉毒素淋洗液的一部分注入HPLC 中,对黄曲霉毒素B1,B2,G1,B2 分别进行定量分析.免疫亲和柱是用大剂量的黄曲霉毒素单克隆抗体 固 化在 水不 溶 性的 载体 上 , 然 后装 柱而 成 . 该 方法 的测 定 范 围 0-300ug/kg. 2 酶联免疫吸附法（ELISA 法） 原理:将已知抗原吸附在固态载体表面 ,洗除末吸附抗原,加入一 定量抗体与待测样品(含有抗原)提取液的混合液,竞争培养后,在固相 载体表面形成抗原抗体复合物.洗除多余抗体成分,然后加入酶标记的 抗球蛋白的第二抗体结合物,与吸附在固体表面的抗原抗体结合物相 结合,再加入酶底物.在酶的催化作用下,底物发生降解反应,产生有色 物质,通过酶标检测仪测出酶底物的降解量,从而推知被测样品中的抗 原量. ELISA 方法通常用于大规模的筛选，由于其高同量的特点，是一 种性价比很高的测试方法。 同科研究所提供部分标准： GB-T 18980-2003 乳和乳粉中黄曲霉毒素 M1 的测定 免疫亲和层析 净化高效液相色谱法和荧光光度法 GB/T 18979-2003 食品中黄曲霉毒素的测定 免疫亲和层析净化高效 液相色谱法和荧光光度法 GB/T 23212-2008 牛奶和奶粉中黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2、M1、 M2 的测定 液相色谱-荧光检测法 SN/T 1664-2005 牛奶和奶粉中黄曲霉毒素 M1、B1、B2、G1、G2 含 量的测定 NY/T 1664-2008 牛乳中黄曲霉毒素 M1 的快速检测 双流向酶联免疫 法 GB 5413.37-2010 食品安全国家标准 乳和乳制品中黄曲霉毒素 M1 的测定 ISO 17375-2006 动物饲料.黄曲霉毒素 B指数 1测定 BS EN ISO 17375-2006 动物饲料.黄曲霉毒素 B指数 1测定 DIN EN ISO 17375-2006 动物饲料.黄曲霉毒素 B1 测定 NF V18-200-1980 饲料.黄曲霉素 B1 含量的测定 BS 5766-7-1988 动物饲料分析方法..第 7 部分:黄曲霉毒素 B1 测定 ISO 14675-2003 牛奶和牛奶制品.竞争酵素免疫分析的标准化描述指 南.黄曲霉毒素含量的测定 ISO 6651-2001 动物饲料 黄曲霉素 B1 的半定量测定 薄层色谱法 DIN EN ISO 14501-2008 乳和乳粉 黄曲霉素 M1 含量的测量 免疫亲 和层析净化高效液相色谱法 BS EN ISO 14675-2003 牛奶和牛奶制品.竞争酵素免疫分析的标准化 描述指南.黄曲霉毒素 M$—1 含量的测定 ISO 14501-2007 牛奶和