细胞生物学技术B 15免疫荧光.pptVIP

细胞免疫荧光技术;在原位观察到化学成分,提供什么信息？;1.保持细胞、组织的固有形态和结构； 2.防止细胞的自溶，以免使抗原扩散至组织间质； 3.细胞内蛋白质凝固; 4.保持组织或细胞化学成分的某些属性,如抗原性或核酸杂交活性。;特点2.细胞化学反应及可见性;实验目的;人体和其他多细胞生物都由细胞按特定方式有序构建;细胞内锚定蛋白 （与骨架附着）;实验原理;肌动蛋白：细胞骨架微丝的单体 鬼笔环肽：是一种高亲和力F肌动蛋白探针， 可与F肌动蛋白特异结合。 四甲基罗丹明(TRITC)： 激发光/发射光波长: 540/565 nm， 红色荧光染料。 ;实验用品;一，细胞制备和细胞固定;实验步骤;实验结果;注意事项;免疫细胞化学技术;“Step by step”实验步骤;实验样本;实验样本;固定;交联试剂;抗原修复;热抗原修复;封闭;封闭;通透（permeabilization）;一抗孵育;二抗孵育;酶标还是荧光标？;复染;封片并观察;没有信号/染色;高背景染色;不正确的信号;细胞/组织的形态被破坏;思考题