第04章 裂殖壶菌生产二十碳六烯酸技术的发展：历史观点与更新介绍 童愈元.docVIP

PAGE  PAGE 45 第四章 裂殖壶菌生产二十碳六烯酸技术的发展：历史观点与更新介绍 长链ω- 3脂肪酸对人体健康的重要性 对长链多不饱和ω-3脂肪酸（LC-PUFAs），二十碳五烯酸（EPA,20:5n-3）和二十碳六烯酸（DHA，22:6n-3）营养的重要性的认识，开始出现于80年代中期。前二十年的研究指出：（1）通过引进现代农业的实践，人体摄入脂肪酸要更高；（2）脂肪酸摄入量较高的这些人群表现出慢性疾病，包括心血管疾病，关节炎，哮喘，糖尿病。(3)独特的化合物，叫做花生酸，是从这些不饱和脂肪酸而来，这些花生酸有保护作用，对一些疾病的研究正在逐步发展。 在80年代，ω-3多不饱和脂肪酸在人类饮食中的主要来源是鱼或鱼油胶囊。鱼油消费在北美历来较低，鱼油胶囊不受欢迎因为人们接受不了其劣质感官（味觉、气味）特性。由于其强烈的鱼气味问题，试图利用鱼油作为食品成分亦大多不成功。试图改善鱼油的感官特性仍然不成功，出现了关注环境污染水平（多氯联苯，二噁英和汞）的鱼类报告，这将继续给我们造成麻烦。 我们知道现在多不饱和脂肪酸的主要来源不是由鱼的生物合成，而是由他们的饮食产生，是食用浮游生物的结果。我们假设，如果能够开发一种在经济上培养一种微生物菌株，特别是含有丰富的ω-3多不饱和脂肪酸，这将提供一个可以接受的这些化合物的来源，将会避免在鱼和鱼油中发现的感官和环境污染问题。虽然鱼油含有EPA 和DHA，而且大部分研究表明了鱼油中包含的ω-3多不饱和脂肪酸的重要性，但是我们作出决定最初专注于DHA的生产。新的研究表明，尽管EPA有明显的抗炎作用，DHA对婴儿营养很重要，对成人血脂及心血管健康产生积极影响，更有效的在人体内保留，并且可以随时产生EPA。这些和其他因素表明，DHA可能更好从ω-3多不饱和脂肪酸座位食物成分或营养消费与补充中获得。 ω-3多不饱和脂肪酸的来源 海洋微藻被确认是生来ω-3多不饱和脂肪酸的主要微生物。细菌与酵母不知能生产ω-3多不饱和脂肪酸，后来，少数细菌菌株在深海鱼肠中被发现可以产生EPA，但仅在磷脂中形成。因为磷脂在微生物中的干重最高只有10-15%，一个产生长链ω-3多不饱和脂肪酸的磷脂在经济上不能算是一个产生DHA的合适的选择。然而，一些微藻和真菌可聚合作为三酰基甘油干重的80%。从微生物菌种中生产DHA的成本需要用到微生物，这能生产大量的三酰基甘油。 虽然在一时，室外池塘和光生物反应器是生产微藻最普遍采用的系统，但是这些系统的使用非常昂贵，因为是非常低的生产能力和细胞浓度，而又需要大量的水用来离心回收生物量，缺乏控制形成最大化目标产品，以及无法保障在户外系统生产食品级的。尽管已提出在大型发酵罐生产藻类，但是这个研究主要侧重于淡水微藻，实际生产不出ω-3多不饱和脂肪酸。此外，由于ω-3多不饱和脂肪酸与微藻的光合作用无关，但有最初对只用非光合作用生产系统实现这些脂肪酸氧自由基的产生。 在一段时间，两个长链ω-3多不饱和脂肪酸的竞争过程在发展。日本学者试图修改为在花生四烯酸的发酵过程中利用被孢酶的真菌也能产生EPA。修改的过程包括在低温条件下生长的真菌或冷了好几天生产的EPA的收获量。然而，这些修改导致非常低的整体生产力。竞争过程中所涉及的第二个通过发酵培养的隐甲藻生长缓慢。我们相信，这两项技术的改善在他们可以使廉价生产所需的DHA在食品生产成本的有效成分很有必要。 替代技术发展的必要 认识到一个多不饱和脂肪酸替代来源的需要，在当时在开发具有竞争力技术状态的反应，我们作出决定，追求一种替代技术开发利用的一组不同的假设。第一，我们认为目前还没有已知的微藻在在一定成本下针对鱼油可有效地生产ω-3多不饱和脂肪酸。一种微生物的生产技术的发展需要ω-3脂肪酸的新的，自然生产的分离与鉴定过程。第二，这些菌株需要在较高温度下产生长链ω-3脂肪酸，这在当时是有悖常理的，通常这些脂肪酸的生成是在较低温下，并尝试保持其细胞膜的弹性与运作的。第三，我们认为解决这些重大腐蚀问题根本需要是联系在与海洋微生物生长相关的不锈钢发酵罐的。其他的都生长在玻璃海洋微藻发酵罐里，以免受到腐蚀。然后大规模的发酵罐非常昂贵，在世界各地只有少数商户提供。玻璃发酵罐只是部分解决了这个问题，而忽略了远离海洋的下游加工设备的腐蚀与高盐的废物的位置问题。最有可能的生产候选者将可能是海洋毒株，新的在非常低矿化度的条件下培养他们的新计划就必须发展，以尽量减少海洋发酵介质的腐蚀作用。 在确定所有的替代技术以后，我们决定迅速、有竞争力并全面解决所有这些问题的最好的方法是利用一个合理的生物方法来收集、隔离与筛选。这种做法能够确保菌株的富集与鉴定，很有可能是全部或大部分的理想生产技术，极大的方便了发展的需要。本文描述了生物方法产生微藻技术的发展，这种发展在激