第一章蛋白质的化学剖析.ppt

第一章 蛋白质的化学;蛋白质 是由许多不同的α-氨基酸按一定的序列通过酰胺键（肽键）缩合而成的，具有较稳定的构象并具有一定生物功能的大分子。;一、蛋白质的生物学意义;二、蛋白质的元素组成 与 分类;蛋白质的分类;2. 分子组成;3. 功能分类;三、蛋白质的氨基酸组成;不带电形式;（二）氨基酸的分类;3. 不常见的氨基酸 以及 非蛋白氨基酸 （1）5 – 羟赖氨酸、4 – 羟脯氨酸 （胶原蛋白） 3,3’,5 – 三碘甲腺原氨酸（甲状腺球蛋白） 甲基组氨酸、 ε-N-甲基赖氨酸等（肌肉蛋白） N-甲基精氨酸、N-乙酰赖氨酸（组蛋白） （2）非蛋白质氨基酸：γ-氨基丁酸（GABA）是谷氨酸脱羧产生，具有传递神经冲动的功能。（神经递质） 鸟氨酸、瓜氨酸等是氨基酸代谢中间产物。;（三）氨基酸的重要理化性质;H3N—CH—COOH;氨基酸等电点的确定：;2;3. 化学性质;（2）与甲醛的反应：氨基酸的甲醛滴定法;（3）与2,4-二硝基氟苯(DNFB)的反应;H2N—CH—COOH +;（4）与异硫氰酸苯酯（PITC）的反应;（6）与荧光胺反应：氨基酸与其反应产生荧光产物 根据荧光强度测定氨基酸含量（ng级）。激发波长λx=390nm，发射波长λm=475nm;H2N—CH;（7）成盐反应;（9）成酯反应;（11）成酰胺反应;（13）迭氮反应;四、肽;肽的结构;生物活性肽BAP （一）谷胱甘肽（GSH）;（三）促肾上腺皮质激素（ACTH）;（五）胰高血糖素;活性肽的来源;五、 蛋白质的结构;HPhe-Val-Asn-Gln-His-Leu-Cys-Gly-Ser-His- Leu-Val- Glu- Ala- Leu- Tyr –Leu -Val-Cys-Gly;一级结构确定的原则：将大化小，逐段分析，制成两套肽片段，找出重叠位点，排出肽的前后位置，最后确定蛋白质的完整序列。;由于羰基碳-氧双键的靠拢，允许存在共振结构（resonance structure），碳与氮之间的肽键有部分双键性质，由CO-NH构成的肽单元呈现相对的刚性和平面化，肽键中的4个原子和它相邻的两个α-碳原子多处于同一个平面上。;1. 蛋白质的二级结构;3) R侧链基团伸向螺旋的外侧。;（2）β折叠（β-pleated sheet）;Cα;（3）β转角（β-turn, β-bend ）;（4）β凸起（β-bugle）;2. 超二级结构和结构域;3. 蛋白质的三级结构;4. 蛋白质的四级结构;共价键;六、蛋白质结??与功能的关系;不同物种的胰岛素差异在A8,9,10和B30的氨基酸差异。; ;镰刀状细胞血红蛋白致病机理 ;由于β6位于分子表面，伸出HbS分子表面的Val侧链创造了一个“粘性”的突起，与另一HbS分子上的互补口袋通过疏水相互作用而聚集沉淀。 ;（二）蛋白质构象与功能的关系;七、蛋白质的性质;蛋白质分子量（M）与沉降系数（s）的关系;（二）蛋白质的两性电离及等电点;（2）凝胶电泳：用凝胶（淀粉、琼脂糖、聚丙烯酰胺）作支持物。;等电聚焦电泳：当蛋白质在其等电点时，净电荷为零，在电场中不再移动。;（三）蛋白质的变性;（四）蛋白质的胶体性质;（五）蛋白质的沉淀反应;;（六）蛋白质的颜色反应;反应名称 ;（七）蛋白质的含量测定;八、蛋白质的分离分析技术;2. 根据蛋白质分子大小不同进行分离;3. 根据蛋白质带电性质不同进行分离;蛋白质的氨基酸序列的确定