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1.1.2微生物的分离、培养与数量测定同步课件(苏教版选修1).ppt
第2课时 微生物的分离、培养与数量测定;课程标准
1.进行微生物的分离。
2.测定某种微生物的数量。
3.研究培养基对微生物的选择作用。
课标解读
1.尝试进行土壤微生物的分离和计数。
2.尝试从土壤中分离能分解纤维素的微生物。
3.学会从土壤中分离能分解尿素的微生物的方法。;选择分离微生物的原理与方法
根据微生物对_________、_____、___等要求的不同,通过只提供__________生长的必需条件,或加入某些______使_____________不能生长,从而达到选择分离微生物的目的。;菌落与菌苔
(1)菌落
菌落是指_____微生物在适宜的_____培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度,可以形成_________的、有一定形态结构的子细胞生长群体。
(2)菌苔
当固体培养基表面众多菌落_________时,便形成_____。不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有__________,可以成为对该类微生物进行____、____的重要依据。;平板分离法
(1)概念:平板分离法能将___________分离和固定在固体培养基表面或里面,每个孤立的___________经过生长、繁殖均可形成便于移植的_____。最常用的分离、培养微生物的固体培养基是___________________。
(2)类型:平板分离法有多种,如_____平板法、 ____平板法、_________法(包括_____划线、____划线、_____划线和_____划线等)。采取各种平板分离法的目的就是要在培养基上得到目的微生物的_________。挑取该菌落就可进行所需微生物的_______。; 进行平板划线法中交叉划线时,为何总是从上次划线的末端开始下次划线?
提示 平板划线法的目的是将聚集在一起的微生物分散成单个细胞,形成标准菌落,以便分离纯化菌种。故第二次划线应该来自第一次划线区域的菌体,从其末端开始。;微生物分离方法的比较
(1)涂抹平板法与混合平板法比较;混合平板法;(2)几种常用的划线方法及注意事项
①划线方法;②交叉划线法中的注意事项
操作第一步即取菌种之前及每次划线之前都需要进行火焰灼烧灭菌,划线操作结束时,仍需灼烧接种环,每次灼烧目的如下表:;从第二次以后的划线操作总是从上一次划线末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加逐渐减少,最终得到单个细菌繁殖而来的菌落。
微生物分离的目的
自然环境中常常是多种不同的微生物混杂在一起,要对其中的某种微生物进行研究,就必须获得其纯培养物,以排除其他微生物的干扰,为此需使用选择培养基筛选和分离某种微生物。
特别提醒 涂抹平板与混合平板均需使用玻璃刮铲将菌液涂抹均匀,不同的是后者所涂抹的是菌液与琼脂的混合液,且将来经培养后平板表面及内部均含菌落。; 下列有关涂抹平板法,叙述错误的是 ( )。
A.首先将菌液进行一系列的梯度稀释
B.然后将不同稀释度的菌液分别涂抹到琼脂固体培养基
的表面
C.适宜条件下培养
D.结果都可在培养基表面形成单个的菌落
解析 涂抹平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂抹到琼脂固体培养基的表面,进行培养。用不同稀释度的菌液接种,只有在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物被分散成单个细胞,才能够在培养基表面形成单个菌落,而不是所有培养基上均可出现单个菌落。
答案 D;土壤微生物的分离和计数
(1)分离步骤
①准备实验器材。
②采集土壤,制备_____。
③制备_____培养基
利用不同微生物________的不同,可以通过____培养基,排除其他微生物的生长,从而选出所需要的特定微生物,如要分离土壤中能分解尿素的微生物可采用_______________的培养基,并另设一份________的空白对照(以等体积的______
代替)。;④接种
采用3支无菌移液管分别吸取10-8、10-7、10-6g/mL的土壤悬液各1 mL加入培养皿中,每个浓度设置__个重复,并_________,用___________进行分离。
⑤培养与观察
将培养皿倒置于___________中培养1~2 d,观察细菌菌落。
(2)计数菌落
①培养________后取出平板计数,选取菌落数为_______的一组为代表进行统计。
②计数公式
每克土壤样品中的细菌数=某一稀释度几次重复培养后的______
×_________(假定涂抹所用稀释液为1 mL)。
;分离土壤中能分解纤维素的微生物
(1)实验目的
①从土壤微生物中筛选出能___________的微生物。
②研究培养基对微生物的_____作用。
(2)实验原理
土壤中存在大量纤维素分解菌,包括真菌、细菌和放线菌等,它们可以分泌_________,分解和
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