昆明盐矿古老岩盐沉积中的原核生物多样性.pdfVIP

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 !（ #）：#% ’ ($$ 年 月 日 #$$ ! ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ ! )*+,- #$$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 昆明盐矿古老岩盐沉积中的原核生物多样性 肖 炜4 ，彭 谦4 ，刘宏伟4 ，文孟良4 ，崔晓龙4 （4 云南大学 云南省微生物研究所 云南省生物资源保护与利用重点实验室 昆明 .$$%4） （# 昆明理工大学 生物与化学工程学院 昆明 .$##!） （( 云南大学 生命科学教学实验中心 昆明 .$$%4）（! 云南盐化股份有限公司 昆明 .$$44） 摘 要：应用 2/K5LMM 和 +KN) 分析法研究了昆明盐矿古老岩盐沉积中的原核生物多样性。样品的细菌 LMM 分 析得到 # 条带，古菌得到 4= 条带。样品与纯培养得到的 4% 个属菌株的 LMM 图谱对比分析发现，细菌 4= 个属菌 株，只有 4 个属菌株与样品中的 4 条带迁移位置都不一致；古菌 4 个属的菌株不与样品中任何条带迁移位置一致。 表明纯培养所得菌株并非该环境中的优势类群。同时，建立了样品细菌和古菌的 4.O +LN) 克隆文库，从中分别挑 取 (. 个细菌克隆和 #$ 个古菌克隆进行 )KLK) 分析。细菌可分为 4$ 个 P7QR，其中 ( 个 P7QR 是优势类群，分别占 (=E%S，#E$S，4.ES，其余 个 P7QR 各含有 4 个克隆。古菌分为 = 个 P7QR，没有明显的优势类群。每个 P7Q 的 代表 克 隆 序 列 分 析 表 明，细 菌 分 属 大 类 群： ， 和 ，以 4.O +LN) ( !52+HT8HU;@T8+,; 52+HT8HU;@T8+,; )@T,DHU;@T8+,; !#$%’() 属菌为优势，含有其它岩盐沉积中没有发现的 )@T,DHU;@T8+,;。古菌主要是 *)+,$-,$’ 属、*)+.#,,/0#() 属菌和未培养古菌。本研究表明，昆明盐矿古老岩盐沉积具有较丰富的原核生物多样性，含有大量未知的、未培养 或不可培养的原核生物，但在原核生物物种组成和丰度上，免培养与此前的纯培养研究结果存在一定差异。因此， 结合使用两类方法才能较全面地认识高盐极端环境微生物的多样性。 关键词：古老岩盐沉积；4.O +LN)；2/K5LMM；克隆文库；)KLK)；原核生物多样性 中图分类号：V%(% 文献标识码：) 文章编号：$$$45.#$%（#$$）$#5$#%5$. 高盐环境作为研究微生物多样性的模式系统正 入微生物生态学的研究，这些技术不需要获得微生 受到越来越多研究者的关注。大量盐湖、盐碱土、晒 物的纯培养物便可更为客观地了解环境微生物的多 盐池和海底沉积物得到全面而深入的研究。但自从 样性，这 类 方 法 被 统 称 为 免 培 养 方 法（@A-T,Y;T,HD5 ［ ］ 4%4( 年 N;?CR-HJRW, 首先认识到盐矿微生物以来 4 ， ,DF8*8DF8DT ?8TGHF）。免培养方法的使用极大地推 只有少量研究描述盐矿中微生物的多样性［4