第6章色谱分离过程选编.pptVIP

第6章 色谱分离过程 Chromatography;2;定义——也称色谱层析、色谱、色层；样品中各组成依据其在固定相与流动相之间作用行为的差别进行多次分离的过程。 发展史——1903年一位俄国植物学家首次提出。1931年首次应用于制备；1938年适用范围扩展至无色物质；…… ;1903年俄国植物学家Tswett实验示意图;色谱法的特点;6.2 色谱分离过程的基本原理;分配系数的微小差异→吸附能力的微小差异 微小差异积累→较大差异→吸附能力弱的组分先流出； 吸附能力强的组分后流出;2.固定相（色谱柱填料）;3.色谱柱及柱技术;6.3 色谱的分类; ④按分配原理分：;基本类型色谱法的分离机制;（一）吸附色谱法;分离机制： 各组分与流动相分子争夺吸附剂表面活性中心 利用吸附剂对不同组分的吸附能力差异而实现分离;（二）分配色谱法;图示;（三）离子交换色谱法;图示;（四）空间排阻色谱法;图示; 结论：;亲和色谱（Affinity chromatography）;色谱图及有关术语 色谱图是以组分的响应信号（或浓度）为纵坐标，时间为横坐标的色谱流出曲线；它提供定性和定量分析的依据及色谱操作条件的有关信息。如下图：;(1)基线—没有组分进入检测器时，检测器系统的噪声随时间变化的曲线通常为一条直线。当系统不稳定时，基线会随时间而定向缓慢变化的现象，称为基线的漂移；当系统不稳定时，不同因素引起基线的起伏变化的现象，称为基线的噪声。 (2)保留值—是色谱法定性的依据。可以用组分在色谱柱中的滞留时间或使组分流出色谱柱所需要的流动相体积表示。 ①死时间（tR0）--不与固定相发生作用的组分（空气或甲烷）流过色谱柱所需的时间。死时间正比于色谱柱中的空隙体积。 ;②保留时间（tR）--组分流过色谱柱所需要的时间，一般指从进样到柱后组分浓度最大值时所需的时间。 ③调整保留时间（t’R）--扣除死时间后的保留时间 （t’R=tR-tM）。 用使组分流出色谱柱所需流动相体积表示时为： a．死体积（Vm） VM=tMF0 b．保留体积（VR） VR=tRF0 c．调整保留体积（V’R） V’R=t’RF0=VR-VM ;(3)峰高与峰面积 峰高是色???峰的顶点到基线之间的垂直距离，用h表示；峰面积是色谱流出曲线与基线所围成的面积，用A表示。 (4)区域宽度 是反映分离好坏的一个重要参数。一般，区域宽度越窄越好。可用三种方法表示： ①标准偏差（σ）：0.607倍峰高处峰宽的一半。 ②峰底宽度（ω）：色谱峰两侧切线在基线上的截距 ω =4σ ③半峰宽度（ ω 1/2）：又称半宽度或区域宽度，峰高一半处的宽度。 ;27; 1.根据色谱峰的数目，可以判断试样中所含有组分的最少个数。 2.根据色谱峰的保留值可以进行定性分析。 3.根据色谱峰高或面积可以进行定量测定。 4.根据色谱峰间距及其宽度，可对色谱柱的分离效能进行评价。 5.色谱峰间距——固定相或流动相选择是否合适的依据。;6.4 色谱分离过程基础理论;②分配比（k’）：又称容量因子。;K和k’与物质及两相的性质有关； K 与k’都是温度、压力的函数； K与两相的体积无关；k’与两相的体积有关，即与相比有关； K与k’是衡量色谱柱对组分保留能力的参数；K与k’值越大，保留时间越长；;④分离度：相邻色谱峰峰顶之间的距离除以此两色谱峰的平均宽度。;⑤柱效率：;2.色谱理论模型;色谱理论包括两方面: 热力学理论：研究分配(分离)过程，塔板理论（plate theory）。 动力学理论：研究各种动力学因素对峰展宽的影响，速率理论（rate theory）。;塔板理论 (the plate model);塔板理论基本假设;38;H=L/N;它们比理论塔板数及高度，能更有效地反映色谱分离好坏与塔板数和塔板高度之间的对应关系。 一般说来，色谱柱的理论塔板数越大，表示组分在色谱柱中达到分配平衡的次数越多，越有利于分离，但不能说明组分间分离的好坏，因为分离好坏决定于各组分在流动相和固定相之间分配系数的差别，而不是分配次数的多少。;无论是有效还是理论塔板数不能作为实际分离可能的依据。另一方面，塔板理论中有很多不合实际的假设，如：假定无纵向扩散、分配系数与浓度无关；再者，塔板理论不能解释塔板高度是受哪些因素的影响及流动相不同流速下测得的理论塔板数不同的事实。因而它有一定的局限性。;2．速率理论 1956年由荷兰学者范弟姆特把影响塔板高度的动力学因素与塔板理论结合起来，导出了塔板高度与流动相线速关系的方程。认为色谱峰的总扩张等于各独立