表达绿色荧光蛋白猪源植物乳杆菌重组菌株的构建.pdfVIP

???簿 麓??? 幕 ??甥? ??—????????????????????：???·? 燕? 毅? 表达绿色荧光蛋 白猪源植物乳杆菌? 重组菌株的构建? 王? 晶 ，季海峰?，王四新 ，张 董燕 ，刘? 辉 ，王雅 民? ?北 京 市 农 林 科 学 院 畜 牧 兽 医研 究 所 ，北 京 ???????? 摘? 要 ：为 了深 入 研 究 益 生 茵 猪 源 植 物 乳 杆 茵 的 作 用 机 理 ，构 建 含 有 标 记 基 团 绿 色 荧 光 蛋 白 的 植 物 乳 杆 菌 重? 组 菌 株 ，以 达 到 良好 区 分 动 物 内外 源 菌 的 目的 。以 具 有 红 霉 素 耐 药 性 ????和 氨 苄 青 霉 素 耐 药性 ??????双 筛 选? 压 力 的 大 肠 杆 菌— — 乳 酸 杆 菌 穿梭 表 达 载 体 ???????为 基 本 骨 架 ，将 绿 色 荧 光 蛋 白 ?????及 其 表 达 原 件 乳 酸? 脱 氢 酶 启 动 子 ??????? 和 嗜 酸 乳 杆 菌 表 面 蛋 白 终 止 子 ???????插 入 该 载 体 ，构 建 ???标 记 的 穿 梭 表 达 载 体? ???????一???。利 用 电 转 化 的 方 法 将 穿梭 表 达 载 体 ???????一???转 化 入 植 物 乳 杆 菌 ，获 得 重 组 植 物 乳 相 菌 。结? 果 表 明 ：重 组 茵在 蓝 光 激 发 下 可 见 明 显 绿 色 荧 光 。连 续 传 递 ??代 仍 可 见 明 显 荧 光 。 结 果 显 示 ．已成 功 构 建 表 达? ???基 因 的 重 组 植 物 乳 杆 菌 ．为 益 生 茵 在 动 物 体 内分 布 和 定 植 规 律 的 研 究 奠 定 了基 础 。? 关 键 词 ：植 物 乳 杆 菌 ；绿 色 荧 光 蛋 白 ；穿 梭 表 达 载 体? 中 图 分 类 号 ：????．???? 文 献 标 识 码 ：?? 文 章 编 号 ：????— ????????????— ????— ??? 乳 酸 菌 制 剂 作 为 新 型 饲 料 添 加 剂 微 生 态 制 剂 中? 法 真正 区分 肠道 内的乳 酸菌 是 内源产 生还 是外 源 添? 效 果 较 好 的 一 类 ，近 年 来 受 到 广 泛 关 注 。 大 量 研 究? 加 ，因此 其作 用机 理至今 还 不清楚 。之前 采用 的 测? 已证实 ．这类 微生 物添 加剂具 有 良好 的生 物学功 能 。? 定 活体仔 猪 胃肠道 中乳 酸菌 数量 或其 他 的一些 分 子? 在 动 物生 产 中应 用 可 以抑 制肠 道 病 原 菌 的繁 殖 ，从? 生 物学方 法 ?如标 记探 针技术 、???指纹 技术 等 ?，均? 而 防止 动物 腹泻 、增加 营养 物质 利用率 、提高其 生产? 由于种种 原 因无法 良好地 实现 仔猪 内源产 生和外 源? 性 能 。乳酸 菌 的作 用被 认为 主要 是通过 产 生优 势菌? 添加菌 的有效 区分??。绿色荧 光蛋 白??