植物microRNA功能瞬时验证体系的建立.pdfVIP

生? 物? 技? 术 通? 讯 ? ????????????????????????????·． ?????．·??????．?????? ??? ???：??．?????．????．????—????．????．??．???? 研 究报告? 植物 ????????功 能瞬 时验证体 系的建立? 赵文婷? ，高志晖?，孟冬 。，刘晓东?，魏建和? ?．中国医学科 学院?北京协和 医学院 药 用植 物研 究所 ，北京 ??????；?．东北林业 大学 ，黑龙 江 哈 尔滨 ??????；? ?．中国农业 大学 ，北京 ??????；?．中国医学科 学院＆北 京协 和 医学院 药用植 物研 究所海 南分所 ?海 南省 南药资源? 保 护 与 开 发 重 点 实验 室 ?，海 南 万 宁 ??????? ?摘要 ?? 目的 ：建立植物 ???????????????功能的瞬 时活体 验证体 系，并检验该体 系 的有效 性。方 法 ：选用双元表? 达 载体 ???????????，并插 入烟草花 叶病毒双 ???启动子 ，以驱动 目标 ?????超表达 ；选 用双元表达载体 ????????? 的绿色荧光 蛋 白?????改造 载体 用于潜在 的靶基 因与 ???融合 蛋 白的超表达 ，以转入这 ?种载体 的农杆菌侵染烟草? 叶片，观察 ???融合 蛋 白的荧光 ，作 为验 证 ?????对其潜 在靶基 因调控作用 的瞬时验 证体 系。选取拟南芥 已知功 能? 的??????及其 靶基 因????，分别 构建 ???????????—???—??????和 ????????一???—????载体 ，利用农杆 菌注射? 烟 草叶 片进 行 ?个 载体共 转化 ，并 以????????一???—????单 转化作 为对照 ，激光共 聚焦显微镜 下观察 融合 蛋 白的? 表达 。结 果 ：只将 ????导入烟草表皮细胞 ，可观察到绿色荧