独一味基因表达SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立.pdfVIP

广东农 业科 学 ????年第 ??期? ???? 独— 味基 因表达 ????????????荧光定量? ???检测方法的建立? 杨 晓丽 ，罗桂 花 ，陈? 志 ，乔 枫? ?青海 师范 大学 生命 与地理 科学 学 院／青藏 高原 资源 与环境 教育 部 重点 实验室 ，青海 西 宁 ???????? 摘 要 ：为 了建立 一种 检 测独 一 味 ????表 达水 平 的 ????????????荧光 定 量 ???— ????????方 法 。根据 独 一? 味查 尔 酮合 成 酶 ???????和 苯丙 氨 酸解 氨 酶 ???? ?基 因序 列设 计 特异 性 引 物 ，运 用 ????—???????—??? 方法 建 立? 独 一 味基 因的荧 光定 量标 准 曲线 ，进一 步研究 独 一 味 ???和 ???基 因在 不 同组 织 中的表 达 。结 果显 示 ，扩增 曲线 在? ?×???～????“??????／???范 围内有 很好 的 线性 关 系 ，扩 增 相关 系 数在 ?．???以上 。熔解 曲线 分析 表 明 ，产 物 为特 异 单? 峰 ，无引 物二 聚体 ，具有 较 高的 特异 性 和灵 敏度 。独 一 味 ???基 因在 不 同组织 中表达 量顺 序 为花 ?叶?叶柄 ?根 ?茎 ．? ?基 因表 达量顺 序 为叶柄 ?叶?花?根 ?茎 。建立 的检 测方 法能 够成 功用 于 独一 味 ???和? 基 因表 达 的检测 ．为? 研 究独 一味 在 ????水平 的定 量分 析提 供技 术平 台。? ，? 关键 词 ：独 一味 ；????????????；荧 光定 量 ??—???：???；???? 中图分 类号 ：????．??；????．?? 文 献标 识码 ：?? 文章 编号 ：????—????????????—????—??? ?????????? ????????????????? ????????????????????? ?????????????????????????????????????????????????? ????????????????????????????．?? ?????????—??，???????—???，????????，?????????? ????????????????????????????????????????，???????????????????????????????????? ?? ???? ? ???????????????????????????????????????????????，?????????????，??????? ?????