提高拮抗菌WB3对番茄灰霉病菌拮抗能力的He-Ne激光与氯化锂复合诱变技术.pdfVIP

第 4O卷第 3期 光 子 学 报 Vo1．40No．3 2O11年 3月 ACTA PH()T()NICA SINICA M arch 201l 文章编号 ：l004—4213(2011)030443-5 提高拮抗菌 WB3对番茄灰霉病菌拮抗能力的 He—Ne激光与氯化锂复合诱变技术 任涛涛 ，田永永 ，谢云 ，陈五岭 (西北大学 生命科学学 院，西安 710069) 摘 要 ：利用 He—Ne激光 (波长 632．8nm，功率 12mW)与氯化锂 复合诱 变一株番茄灰霉病 菌拮抗 菌WB3，获得 14株拮抗效果突出的菌株，其最大抑菌带宽为 15．7mm．综合单一诱变组里菌株致 死率 以及拮抗 能力的大小，其 中辐照时间为 30min，氯化锂浓度为 1．2 时为复合诱 变最佳条件． 经过复合诱变 ，L8拮抗茵最高抑菌带宽可提高 l4 以上 ，而单一 He—Ne激光诱 变后抑菌带宽提 高 8．8 ，单一氯化锂诱变后抑菌带宽提 高9 ．L8菌株 生长迅速 ，经传代培养证 明其抑菌性能具有 稳定遗传性．该实验研 究HeNe激光与氯化锂 复合诱 变枯草 芽孢杆菌 WB3的方法可应用于番茄 灰霉病 的生物 防治领域． 关键词 ：He—Ne激光 ；氯化锂 ；番茄灰霉病菌 I才吉抗菌 WB3；复合诱变 中图分类号 ：Q933 文献标识码 ：A doi：10．3788／gzxb201l4003．0443 0 引言 级 ，引起菌体分子变异；热效应引起酶失活 、蛋 白质 变性 ，导致菌体的生理 、遗传变异；压力效应使组 番茄 灰 霉 病 是 由半 知 菌 亚 门灰 葡 萄孢 属 织变形 、破裂 ，引起生理及遗传变异 ；电磁场效应 ¨s] (Botrytiscinerea)真菌侵 染所致 ，是 一种严 重 的世 产生 自由基导致 DNA损伤 ，引起突变． 界性病害．目前，生产上对番茄灰霉病防治主要依靠 最近 ，利用低能激光诱 变技术获得 的突变菌株 抗病品种和化学防治，但 由于病菌抗药性迅速产生 已经 引起 了关注 ]．Kohli等 已经报道用经 He—Ne 使化学药剂防治效果大大下降，并且严重污染农产 激光 (632．8nm)照射 大肠杆菌 (Escherichiacoli) 品和环境 ，危及人畜健康 ，国家 已经禁止一些高毒 、 KY7O6／ptI1菌株 ，可诱导 phr基 阗的表达f9101； 高残留的化学农药的使用 j．因此，近年来人们通过 Karu等确定 了大肠杆菌经 HeNe照射后细胞数量 筛选和利用抗灰霉病的有益微生物及其次生代谢产 变化的机制 [1】．同内利用激光诱变育种也有许多成 物 ，使生物防治 日益成为灰霉病控制 中的一条重要 功的例子[1 】．但是，将 He—Ne激光 与氯化锂复合 而有效的途径 【】． 诱变应用于芽孢杆菌遗传变异的研究和环境微生物 HeNe激光诱 变是一种高效的诱变育种新技 诱变育种领域 的研究还 比较少 ，如利用复合诱变选 术 ，具有能量密度高 、靶点小、单色性和方 向性好 ．以 育拈抗能力提高 的突变株．本 文主要 以芽孢 杆菌 及诱变当代就可 出现遗传性突变等特点 ，因此在微 WB3菌株为供试菌株 ，利用 He—Ne激光 与氯 化锂 生物育种中得到广泛的应用．激光是一种量子流 ，直 复合诱变，选育对番茄灰霉病菌拈抗能力有显著提 接或 问接地影 响生物有机体 ，能够引起细胞 DNA 高的突变菌株 ，以期得到拮抗效果更好 、稳定性更