第一章无茵操作技术实践第1课时复习学案苏教版选修1.docVIP

PAGE  PAGE - 6 - 第一章 无茵操作技术实践 第1课时 复习学案 苏教版选修1 微生物营养要素及培养基配制过程、原则 1、微生物的营养要素 微生物的营养物质主要包括碳源、氮源、水、无机盐和生长因子五大类，列表总结如下： 营养物质含义作用主要来源碳源能提供碳元素营养的物质构成生物体细胞物质和一些代谢产物，有些是异养生物的能源物质无机碳源：CO2、、NaHCO3； 有机碳源：糖类、脂肪酸、花 生饼粉、石油等。氮源提供氮元素的物质合成蛋白质、核酸以及 含氮的代谢产物无机氮源：N2、NH3、铵盐、 硝酸盐； 有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋 白胨等；生长因子生长必不可少的微 量有机物酶和核酸的组成成分维生素、氨基酸、碱基等水在生物体内含量很高，在低等生物体 内含量更高不仅是优良的溶剂，而且可以维持生物大分子 结构的稳定 无机盐为微生物提供C、N等元素之外的各种重要元素，包括大 量元素细胞内组成成分，生理调节物质；酶的激活 剂等 特别提醒： 微生物最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐；对于异养生物而言，含有C、H、O、N的化合物既是碳源也是氮源，也可能是能源；NaHCO3既是无机盐，也是自养微生物的碳源；绝大多数微生物缺乏合成生长因子的能力或合成能力有限，所以要在培养基中加入生长因子。 2、微生物培养基的配制（以牛肉膏蛋白胨培养基为例） （1）配制培养液 在200 mL烧杯中加入100 mL蒸馏水，再加入0. 5 g牛肉膏、l g蛋白胨、0. 5 g NaCl、1g琼脂，边加热边搅拌，配制成培养液。 （2）调节pH 采用pH试纸测试，调节培养基的酸碱度至7. 0～7. 2。 （3）分装 将培养基趁热分装到洁净的试管中. 培养基的高度约为试管高度的1／5。注意不要污染试管口，用棉花塞塞紧试管。 （4）包扎 将3～5支试管扎成一捆，外包1层牛皮纸或2层报纸，用线扎好。在试管壁上注明培养基的名称、组别、配制日期等。 （5）灭菌 高压蒸汽灭菌是常用的灭菌方法。在温度为121℃，气压为1.0 kPa的条件下灭菌20 min。切断电源，待压力表中指针指向“0”点后，取出灭菌物品。 （6）搁置斜面 待试管冷却至50℃左右，将试管口部枕在高约1 cm的木条或其他合适高度的物体上，使其自然倾斜，斜面长度不超过试管总长的1／2。 3、微生物培养基的配制原则 （1）目的要明确（根据微生物的种类、培养目的等）。如培养基可由简单的无机物组成，生产用的培养基内可加入化学成分不明确的天然物质，而分类鉴定用的培养基内必须加入已知化 学成分的物质。 （2）营养要协调。注意各种营养物质的浓度和比例。 （3）pH要适宜。各种微生物适宜生长的pH范围不同。如细菌、放线菌和真菌的最适pH分别为：6.5～7.5、7.5～8.5、5.0～6.0。 4、高压蒸汽灭菌 （1）原理：将待灭菌的物体放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内；把锅内的水加热煮沸，并把其中原有的冷空气彻底驱尽后将锅密闭；再继续加热就会使锅内的蒸汽压逐渐上升，从而温度也随之上升到100℃以上。 （2）设备：主要是高压蒸汽灭菌锅，实验室中以手提式最为常用。 （3）使用方法 1）加水：是指使用前在锅内加入适量的水。 2）装锅：装入待灭菌的物品，不能太满，盖好锅盖，按对称方法旋紧四周固定螺栓，打开排气阀。 3）加热排气：接通电源加热，待水煮沸后。使蒸汽和空气一起从排气孔排出。 4）保温保压：当压力表指针指到121℃时，调节热源，使压力维持不变，并开始计算灭菌时间，根据灭菌的物品确定灭菌时间。 5）出锅：当压力表中指针降至“0”点，稍停，使温度继续降至100℃以下后，打开排气阀，旋开固定螺栓，开盖，取出灭菌物品。 特别注意： ①使用高压蒸汽灭菌锅时，加压之前一定要把原先的空气排尽，否则达不到指定的灭菌温度；注意恒温灭菌。灭菌完成后要等压力表中读数为“0”后，先放气再打开灭菌锅盖。②灭菌是指杀死微生物的营养体、芽孢和孢子，而消毒仅是杀死微生物的营养体，防腐则是抑制微生物的生命活动。 知识拓展：常用的灭菌方法包括灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌、紫外线灭菌等，化学消毒剂进行消毒可以配合紫外线灭菌，加强效果。 【典型例题】 例1. 某学校打算开辟一块食用菌栽培基地，以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理，准备食用菌栽培所需的各种原料和用具，然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题： （1）对买回来的菌种进行扩大培养，首先制备试管培养基，写出制备固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料