HPLC的方法及原理教程.pptVIP

High Performance Liquid Chromatography(HPLC);;高效液相色谱; HPLC的应用;HPLC的分类;吸附色谱的分离机理;分配色谱的分离机理; 色谱的固定相;Normal vs. Reversed Phase Chromatography;ＳＯ４２－;分子排阻色谱的分离机理; 可以分为 凝胶过滤 (gel filtration) 凝胶渗透 (gel permeation) Gel Filtration Chromatography: 流动相：为一般水溶液 固定相：为软质胶体，Agarose (sepharose)﹑Dextran (sephadex) ﹑Polyacrylamide Gel Permeation Chromatography: 流动相：为一般有机溶剂 固定相：为硬质胶体，Cross-linked polystyrene﹑Alkylate dextran﹑Controlled-porosity glass beads.;SEC的校正曲线;典型的HPLC系统;;往复泵 ;;;检测器的种类;示差检测器;蒸发光散射检测器;紫外可见检测器;;;Photodiode-Array Detector;;;;Retention time:;主要参数, VR 保留体积, 与柱类型有关。 Vo 是死体积, 柱中液相的体积??? k’ 是容量因子。 ;死体积;;容量因子;= t’R(B) /t’R(A) = KR(B) /KR(A) ;柱效参数;VAN DEEMTER 方程;多路效应 (涡流扩散);纵向扩散;质的转移不平衡;;Δ ;;HPLC的方法开发;分析时要了解哪方面的情况？;分离时要了解哪方面的情况？;方法开发的其他因素;Increasing polarity;一般的具体步骤;改善选择性a的方法;Polarities of common organic functional groups:;;反相色谱的方法开发实例;改变容量因子 K;改变选择性∶a;梯度洗脱的特点;梯度的洗脱方式;梯度洗脱的可变参数;梯度方法开发实例 - 第一步;梯度方法开发实例 - 第二步;梯度方法开发实例 - 第三步;梯度方法开发实例 - 第四步;梯度方法开发实例 - 第五步;梯度方法开发实例 - 第六步;梯度方法开发实例 - 第七步;色谱峰定性;用保留时间定性;进一步的确认;峰一致性的确认;用二极管矩阵检测器比较光谱图;定量分析的具体内容;痕量分析;准确度的影响因素;流速与检测面积的关系;溶剂强度、K及峰高的关系;柱效和峰高的关系;常用的定量方法;峰面积百分比法定量;外标法定量 (一);外标法定量（二）;外标法定量（三）;内标法定量（一）;内标法定量（二）;内标法定量（三）;内标法定量（四）;可接收的检测范围;定量校正曲线