内生放线菌A00122中germicidin生物合成基因的克隆.pdfVIP

第 ??卷 第 ?期? 厦 门大 学 学报 ?自然科 学版 ?? ? ??．??? ??．?? ????年 ?月? ???????????????????????????? ?????????????????? ? ???????? 内生 放 线茵 ???????中 ??????????生物 合成? 基 因的克 隆? 吴 莹 莹?，李瑶 瑶?，郑 忠 辉?，白林 泉?，黄 耀 坚¨? ???厦 门大 学 生 命 科 学 学 院 ，细 胞 生 物 学 与 肿 瘤 细 胞 工 程 教育 部 重 点 实 验 室 ，福 建 厦 门 ??????；? ?．上 海 交 通 大 学生 命 科 学 与技 术 学 院 ，上 海 ???????? 摘 要 ：在 植物 和细菌中 ，???型聚酮合酶能够产生种类多样 的次生 代谢 产物．在药用植 物内生放线 菌 ??????的发酵产? 物 中 ，分 离 到 了一 个 已 知 的 ???型 聚 酮 类 化 合 物 ??????????．对 ??????菌 株 建 立 了 基 因组 文 库 ，根 据 已知 的 同 源 基 因? ????????设 计 引 物 作 为 探 针 对 文 库 进 行 ???筛 选 ，并通 过 ????????杂 交 的 方 法从 阳性 克 隆 ???—??中 定位 了包 含 ?????—? ?????基 因 的 片段 ，经 测 序 得 到 长 度 为 ????????的 完 整 合成 基 因 ．该 基 因 的 获 得 为 深 入 研 究 ???型 聚酮 合 酶 的底 物 选 择? 性 ，通 过 定 向 改 造 的 方 法 获 得 非 天 然 ???型 聚酮 类 化 合 物 提 供 了 重 要 基 础 ．? 关键 词 ：???型聚酮合酶 ；??????????；基因克隆? 中图 分类号 ：?????? 文献标 志 码 ：?? 文章编 号 ：????—????????????—????—??? ???型聚酮 合 酶 ???????????????????????????????广? 的结构 和活性 的该类 化合物 ．? 泛分 布 于植 物 与微 生 物 中 ，是 次生 代谢 产 物 合成 途 径? 本研 究从 药用 植物 喜 树 内 生 放线 菌 ????????中? 中的关 键酶 之 一 ，与 植 物 的花 色 形 成 、抗 逆 性 及 微 生? 分 离获得 一种 ???型聚酮 类化 合 物 ??????????，其 化学? 物 的色 素产 生密 切 相 关．???型 聚 酮 合 酶 的 催 化 机 制? 结构 如图 ?所示 ．该化 合物 最早在 ?????????????????—? 与 ?型 、??型 聚 酮 合 酶迥 然 不 同 ，它 们不 依 赖 于 作 为? ????????????????????一????中被 发 现 ，是 该菌 株孢? 酰基 载体 的 ???结 构 中的 ???磷 酸泛 酰 巯 基 乙胺 ，而? 子萌发 的 阻化 剂???．????年 ，????等 在 天蓝 色链 霉 菌? 是 直接 作 用 于 酰基 一??? 活化 的 简 单 羧