中科院蓝藻蛋白基因组学研究获新进展 (1).pdfVIP

贺宁，等：液相色谱仪的 FDA 仪器认证方法探讨 93 波长示值误差，3 处波长的示值误差应在 –2～2 nm 品进行定量分析，符合仪器认证的要求。 范围内 ( 包含 ±2 nm)，重复测量 3 次，测量结果的 3　自动进样器的准确性和线性 极差即为波长测量重复性，应小于 2 nm。 LC–2010AHT 型液相色谱仪配有自动进样器， 2　检测器线性 检定规程中没有针对自动进样器性能的确认，而自 FDA 对仪器部分的认证需要对分析样品所用 动进样器性能是否正常，直接关系到药物分析结果 的检测器线性进行确认，检测器在一定范围内具有 的准确性。因此需要对自动进样器的准确性［3］和 良好的线性才能保证药品定量分析的准确性。分析 线??进行确认。在干燥洁净的样品瓶中注入纯水约 不同的药品所采用的波长不同，这就需要在药品分 1 mL，在天平上称得样品瓶加纯水的质量 m1，从该 析所采用的波长范围内选取多个点进行检测器线性 样品瓶中进样 50 μL，连续进样 10 次，再次称取进 的确认。检定规程中所列的检测器线性检定方法无 样后的质量 m2，计算自动进样器准确度相对误差。 法满足 FDA 认证的需求，需要与用户沟通制定符合 当相对误差在在 –2.0%～2.0% 之间 ( 包含 ±2.0%) FDA 要求的确认方法。因此针对用户认证需求，对 时，符合要求。 207，254，280 nm 处检测器的测量线性进行确认。 设置液相色谱仪条件［流量：1.0 mL／min ；流 (1) 在 207 nm 处对 5 种不同浓度利巴韦林溶液 动相：纯水 – 乙腈 ( 体积比 85∶15) ；波长：280 nm ； 的响应进行线性测定 ( 流量：1.0 mL／min ；流动相： 色谱柱：VP–ODS，C18］。取合适浓度的咖啡因标准 纯水；波长：207 nm ；色谱柱：VP–ODS C18)，待系统 样品，分别以 5，10，15，20，25 μL 的进样体积各进 平衡后，分别取利巴韦林系列标样，以 10 μL 的进 样 1 次，记录色谱图。以不同进样体积进样所得色 样体积各进样 1 针，记录色谱图。 谱峰面积计算线性相关系数 r，当 r ≥ 0.999 5 时，符 (2) 在 254 nm 处选用对氢化可的松溶液的响 合要求。通过以上确认，可以准确地评价仪器自动 应进行线性测定［流量：1.0 mL／min ；流动相：甲 进样器的性能是否正常，以满足仪器认证的需求。 醇 – 纯水 ( 体积比 70∶30) ；波长：254 nm ；色谱柱： 4　结语 VP–ODS C18］，待系统平衡后，分别取氢化可的松系 FDA 没有具体细化仪器认证项目，只是要求对 列标准样品，以 10 μL 的进样体积进样 1 针，记录 液相色谱仪可能影响测量结果的各个参数进行确 色谱图。 认，确认仪器各部分的性能指标是否正常，能否达到 (3) 在 280 nm 处选用对咖啡因溶液的响应进行 样品分析的要求。当然针对不同的药品生产企业及 线性测定［流量：1.0 mL／min ；流动相：纯水 – 乙 分析样品的不同，可