酶动力学及酶反应器.pptVIP

第五章 酶反应工程;5.1 酶反应动力学;;发展概况;;一、单底物酶促反应动力学;;三点假说;米氏方程1;2. Briggs-Haldane稳态学说;米氏方程2;;3 米氏方程的意义;;2)k2的意义(kcat,酶的转换数Turnover Noumber);3）反映了反应速度与底物浓度的关系。;4）反应了酶反应速度与酶浓度的关系;4 Km与Vm的求取;2、Langmuir作图法;二、温度对酶反应速度的影响。;三pH对反应速度的影响;四、抑制剂对酶反应速度的影响;分类;(一) 可逆抑制动力学p214-216;1 竟争性抑制作用;意义;竟争性抑制影响;2、非竟争性抑制作用;最大反应速度下降，Km不变;3 反竟争性抑制作用;Vm,Km都变小;三种可逆模式小结;(二) 底物抑制;底物抑制的可能机理;例:;当底物浓度过高时;(三） 产物抑制;五、激活剂对酶反应速度的影响;5.2 固定化酶反应动力学;5.3 酶反应器;酶催化反应过程示意图;5.3.1酶反应器的特点与类型;一、游离酶反应器 1．搅拌罐式反应器(stirred tank reactor，STR) ：其基本结构由容器、搅拌器及保温装置组成。有时也可在容器壁上装上挡板，以促进反应物的混合。其结构如下： ;特点：结构简单适合小规模生产。可分批或半分批操作。;操作方式;2 超滤膜反应器; 超滤膜(UF)的孔径尺寸为l～lOOnm，可截留的相对分子质量范围为500～10000，它对游离酶和固定化酶(相对分子质量10000～100000)都有较高的截流能力。 常用的超滤膜酶反应器的结构如图所示 ： ;3．喷射式反应器 喷射式反应器是利用高压蒸汽的喷射作用，实现酶与底物的混合，是进行高温短时催化反应的一种反应器。如图所示： ;4．鼓泡式反应器 鼓泡式反应器(bubble column reactor，BCR)是利用从反应器底部通入的气体产生的大量气泡，在上升过程中起到提供反应底物和混合两种作用的一类反应器，它也是一种无搅拌装置的反应器。如图所示： ;二、固定化酶反应器;分批搅拌罐式反应器(batch stirred tank reactor，BSTR)和连续流搅拌罐式反应器(continuous flow stirred tank reactor，CSTR)。如图所示： ;2、固定填充床式反应器;特点;3、流化床反应器(FBR) 装有较小颗粒的垂直塔式反应器(形状为柱形、锥形等)。底物以一定速度由下向上流过，使固定化酶颗粒在浮动状态下反应。;优点: 具有良好的传热、传质性能 。pH、温度控制及气体的供给比较容易。不易堵塞，可适用于高粘液体。能处理粉末状底物。压力降低。 缺点：需保持一定的流速，运转成本高，难于放大。由于酶处于流动状态易破损，流化床空隙较大，酶的浓度不高。底物高速流动使酶冲出，降低了转化率。;4．膜型反应器 由膜状或板状固定化酶组装的反应器 (membrane reactor，MR)。 根据膜组件型式的不同，分为平板式、螺旋卷式、转盘式、空心管式和中空纤维式酶膜反应器五种。 ;特点;5．鼓泡式反应器 使用鼓泡式反应器进行固定化酶的催化反应时，反应系统中存在固、液、气三相，又称三相流化床式反应器。高径比大的反应器称为塔，也称鼓泡塔反应器。 ;特点;5.3.2 酶反应器的选择;1、酶的形状大小及机械强度;2、底物的性质;3、酶的稳定性;5.3.3 酶反应器的操作;酶反应器的微生物污染;酶反应器的发展 一、含有辅助因子再生的酶反应器 许多酶反应需辅因子（如辅酶、辅基、能量供给体等）的协助，辅因子的价格较贵，采用简单的添加方法，经济上不合算。因此，发展了含有辅因子再生的酶反应器，辅因子能反复使用，降低生产成本。 ①利用固??化脱氢酶，将固定化NADH再生为固定化NAD。依靠半透膜，将固定化NAD保留在反应器内。在反应过程中，固定化NAD不断变成固定化NADH，又不断再生为固定化NAD，满足反应所需。 ②麻省理工学院设计的ATP再生酶反应器等。;二、两相/多相反应器 许多底物不溶或微溶于水，如脂肪、类脂肪或极性较低的物质，进行酶转化时，水相中有浓度低、反应体积大、分离困难、能耗大。 酶反应在水-有机相中进行，可大大增加反应时的底物浓度。在两相或多相体系中反应，还可减少底物、特别是产物对酶的抑制作用，使酶反应进行到底及酶的操作稳定性延长。 两相反应：将酶或固定化酶置于水相中，而底物溶于有机相中，在搅拌或乳化条件下反应。有机