第五章各类化学成分分析选编.ppt

第五章各类化学成分分析;讲授内容;第一节 生物碱类成分分析;一、概述;小檗碱;二、理化性质;物理性状;溶解性;溶解性;沉淀反应;显色反应;紫外光谱特征;三、鉴别;1薄层色谱法;例：三妙丸中黄柏及小檗碱的鉴别(苍术、黄柏、牛膝);2纸色谱法;3高效液相色谱法;四、含量测定;（一）总生物碱的含量测定;酸碱滴定分析法;酸碱滴定分析法;例 止喘灵注射液中总生物碱的含量测定—酸碱滴定法;重量分析法;例 昆明山海棠片中总生物碱成分的含量测定—重量法;2分光光度法-直接测定法;;（2）比色法;1）酸性染料比色法;1）酸性染料比色法-基本原理;1）酸性染料比色法;例 风湿骨痛胶囊中乌头总生物碱的含量测定——酸性染料比色法;标准曲线的制备 精密量取对照品溶液0 ml、1 ml、2 ml、3ml、4 ml、5 ml，分别置于分液漏斗中，依次精密加入三氯甲烷20ml，再精密加入pH3.0醋酸盐缓冲液（称取无水醋酸钠0.15g，加水使溶解，加冰醋酸5.6ml，用水稀释至500ml，摇匀，并在pH计上校正）10ml和0.1%溴甲酚绿（取溴甲酚绿0.2g加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.2ml使溶解，用水稀释至200ml，摇匀）2 ml，强力振摇5分钟，静置20分钟，分取三氯甲烷液，用干燥滤纸滤过，以相应试剂为空白，滤液照分光光度法，分别在412nm的波长处测定吸收度。以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。 ;测定法 取装量差异项下的内容物，研细，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醚-三氯甲烷-无水乙醇（16∶8∶1）的混合溶液25ml和氨试液1.5ml，摇匀，称定重量，于快速混匀器上振荡三次，每次2分钟，放置过夜，称定重量，用上述混合溶液补足减失的重量，再于快速混匀器上振荡2分钟，静置，倾取上清液，精密量取5.0ml，置分液漏斗中，加乙醚5ml，用0.05mol/L的硫酸溶液提取4次，每次10ml，分取硫酸液，滤过，合并滤液，置另一分液漏斗中，;加浓氨试剂4ml，摇匀，用三氯甲烷提取4次，每次10ml，分取三氯甲烷层，滤过，合并滤液，蒸干，残渣于105℃加热1小时，取出，放冷，加三氯甲烷分次溶解，转移至25ml量瓶中，加三氯甲烷至刻度，摇匀，精密量取20ml，置分液漏斗中，照标准曲线制备项下的方法，自“精密加入pH3.0醋酸盐缓冲液10.00ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液中乌头碱的量（μg/ml）计算，即得。 ; 该法为酸性染料分光光度法，其水相pH的选择是离子对萃取法取得成功与否的关键，风湿骨痛胶囊测定时的pH是分别取乌头碱标准液以pH2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、5.8、6.0、6.2的缓冲液进行试验结果，表明以pH3.0较为适宜，在该条件下测定供试液吸收度较大，指示液空白试验吸收度较小，且呈色稳定性较好。;2）苦味酸盐比色法;3）雷氏盐比色法;硫氰化铬铵在丙酮中的摩尔吸收系数ε=106．5（单盐），故可根据其吸收值A按下式直接测定而不需绘制标准曲线。;雷氏盐比色法注意事项;处方 益母草 当归 人参 黄芪 何首乌 桃仁 蒲黄 熟地黄 香附 昆布 白术 黑木耳 对照品溶液制备 取盐酸水苏碱对照品适量，精密称定，加0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml含1mg的溶液，即得。 供试品溶液的制备 取装量差异下的内容物，研细，取12g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇50ml，超声处理30分钟，滤过，精密量取续滤液25ml，置50ml烧杯中，置水浴上蒸干，精密加入0.1mol/L盐酸溶液10ml使溶解，即得。 ;测定法 取上述对照品溶液和供试品溶液，各加活性炭0.5g，置水浴上加入1分钟，搅拌，滤过，滤液分别置25ml量瓶中，用0.1mol/L盐酸溶液10ml分次洗涤烧杯和滤器，洗涤液并入同一量瓶中；另取0.1mol/L盐酸溶液20ml置另一25ml量瓶中，作为空白溶液。各精密加新制的2%硫氰酸铬铵溶液3ml，摇匀，加0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，置冰浴中放置1小时，用干燥滤纸滤过，取续滤液，以0.1mol/L盐酸溶液为空白，在525nm的波长处分别测定吸收度，用空白溶液的吸收度分别减去对照品与供试品的吸收度，计算，即得。 ;4）异羟肟酸铁比色法;（二）生物碱类单体成分的含量测定;1薄层色谱法;例 九分散中士的宁成分的含量测定—薄层扫描法;2高效液相色谱法;例 小孩清热止咳口服液中盐酸麻黄碱含量测定—高效液相色谱法;供试品溶液的制备 精密量取本品5ml，加水10ml及浓氨水0.5ml用乙醚提取5次（30ml，30ml，20ml，20ml，20ml），合并乙醚液，加盐酸乙醇溶液（1→20）2 ml，混匀，低温回收溶剂至干，残渣加乙醇5 m