基础生物学实验教材-学生使用版2011.docVIP

PAGE  说明：本教材适用于生命科学类专业，课时安排为30学时加1个实验周。 实验要求： 1、 同学自备：实验报告本、铅笔（2B/HB/2H/3H 各一支，削尖）、削笔刀、软绘图橡皮、圆规、直尺、实验服等用具。 2、 认真预习实验内容，熟悉实验目的、原理和方法。 3、 不迟到、不早退，保持整洁、安静、有序的实验环境。 4、 实验台面保持整洁，书包等物品不能放在试验台上。 5、 药品摆放整齐、有序，公用试剂用毕，物归原处。 6、 凡挥发性、有烟雾、有毒和有异味气体的实验，均应在通风橱内进行。 7、 实验试剂粘到皮肤，应立即用大量水冲洗，并用棉花沾甘油涂沫，将腐蚀物吸收出来；若不慎溅入眼睛，立即报告老师，进行必要处理。 8、 实验废弃物、毒害性实验材料应倾倒在指定地点，统一处理。 9、 不能在实验室内饮食，以免误食和吸入有害物质。 10、实验室内的一切物品，未经老师批准，严禁携带出室外。 11、实验结束，须做好仪器清洗工作，并将实验记录交给教师签字后，方可离开。 12、 使用试剂和各种耗材注意节约；洗涤和使用仪器时应仔细，；面对未知正确操作的仪器，须在教师的指导下使用；仪器发现故障或损坏要及时报告，不得擅自动手检修。凡非正常使用造成的实验设备损坏均要进行等价赔偿。 课 程 时 间 安 排 第五周 实验一 光学显微镜使用与细胞结构观察 第六周 实验二 细胞骨架的光学显微镜观察 第七周 实验三 叶绿体的分离制备与观察 第八周 实验四 植物原生质体的分离和融合 第九周 实验五 DNA的细胞化学――Feulgen反应 第十周 实验六 细胞水平的生物进化 第十一周 实验七 减数分裂 第十二周 实验八 果蝇的饲养、性状观察和雌雄鉴别 第十三周 实验九 果蝇唾腺染色体的观察 第十四周 实验十 鲫鱼的解剖 实验周1周 组织制片技术 自备教学用具：实验报告册、铅笔（2B/HB/2H/3H 各一支，削尖）、削笔刀、绘图软橡皮、圆规、直尺、实验服等用具。 实验1 光学显微镜使用与细胞结构观察 一、实验目的 (1)熟悉普通光学显微镜的主要结构、基本性能和维护方法； (2)掌握低倍镜、高倍镜和油镜的正确使用方法； (3)在普通光学显微镜下识别细胞和细胞器的形态结构； (4)学习和练习徒手切片；掌握生物绘图的方法。 二、实验原理 普通光学显微镜(microscope)利用可见光作光源照明，用玻璃透镜作为成像系统，标本中各点依其光吸收(即光的振幅发生变化)的不同而在明亮的背景中成像。实验室常用的是光学复式显微镜，至少含有两组以上透镜组成，其有效放大倍数可达1,250倍，最高分辨率为0.2μm。 光学显微镜还包括研究用的暗视野显微镜、相差显微镜和荧光显微镜等。 细胞在形态上是多种多样的，它们有共同的基本结构，都由细胞膜(动物)、细胞壁(植物)、细胞质和细胞核组成。—般经过固定和染色处理后，在光学显微镜下是可以看见大多数的细胞器，如线粒体、高尔基体、中心体、核仁、染色体等。 三、实验仪器、材料和试剂 (1)普通光学显微镜、擦镜纸、动植物组织细胞装片、香柏油、二甲苯，无水乙醇、擦镜纸 (2)单面刀片、小镊子、载玻片、盖玻片、吸水纸、胶头滴管、洋葱鳞茎、马铃薯块茎、、黄瓜。 (3)试剂：1％结晶紫水溶液、用50％乙醇配制的1％番红溶液、1％美蓝溶液、碘液； 1％中性红溶液，配法：称取0.5g中性红溶于50ml Ringer液，稍加热(30～40℃)使之很快溶解，用滤纸过滤，装入棕色瓶于暗处保存，否则易氧化沉淀，失去染色能力。临用前，取1％中性红溶液1ml，加入29ml Ringer溶液混匀，装入棕色瓶。 Ringer溶液：NaCl 8.5g(用于青蛙等变温动物则改为6.5g)、CaCl2 0.12g、NaHCO3 0.20g、KCl 0.14g、Na2HP04 0.01g、葡萄糖2.0g，加蒸馏水至1000ml。 四、实验内容与方法 一、观察光学复式显微镜的结构 复式显微镜由光学系统部分和用以装置光学系统的机械部分组成(图1-1)。 1．物镜(objective)：一般在镜头上注明放大倍数和数值孔径（N.A.表示镜口率，反映了镜头分辨力的大小，其数字越大，表示分辨力越高。） 2．目镜(eyepiece)：安装在镜筒上端，也叫接目镜，通常由两个透镜组成，上面的透镜与眼接触，叫接目镜；下面一个靠近视野叫会聚透镜或视野透镜。目镜的作用是将物镜所成的像进一步放大。一般在目镜镜头上注明有放大倍数。 3．反光镜(反射镜，reflecting mirror)：常用的显微镜是在底座上安装卤钨灯光源。 4．